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donne5222

金虫 (小有名气)


[交流] 金属离子最小抑制浓度MIC测试

大家是怎么做微生物的最小抑制浓度实验的呢?  我采用了两种不同的操作步骤,但是得到的结论却是相差甚远,希望得指点。
    培养基:2216E
    所测金属离子:Mn2+  (MnCl2)
    微生物: 需钠弧菌
    原理: 测试加菌24h后,OD值的变化。

方法1: 先配置含不同Mn2+浓度的培养基,每种处理三个平行,然后高温灭菌,冷却后加入过夜菌液,记录初始和24h后的OD值;

方法2: 将培养基和MnCl2分开高温高压灭菌(MnCl2是事先按照各浓度梯度算好之后的量,放入各三角烧瓶中了),待冷却后,将培养基分别倒入各三角烧瓶中,然后加入菌液。

方法1现象:各处理高温灭菌后,各处理均有絮状沉淀出现,所测MIC为:100mM/L
方法2现状:各处理初始状态澄清,没有沉淀出现,但所测MIC为:200mM/L。

上述实验,重复后所得结论一样。

但我不确定到底哪种方法更为合理???
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doukezhiwu

木虫 (著名写手)


★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
donne5222: 金币+3 2013-10-08 13:19:25
方法二较为科学,锰离子回合培养基中的某些成分在高温高压条件下发生化合价变化,导致毒性降低。
2楼2013-10-05 08:40:55
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