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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 做western时 电泳后胶特别软，还容易损坏
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mimi_lala

新虫 (初入文坛)

[求助] 做western时 电泳后胶特别软，还容易损坏 已有5人参与

做western时 电泳后胶特别软，还容易损坏 为什么啊 配胶的试剂都是买的试剂盒不是自己配的 分离胶和浓缩胶都等半个小时多 还不是很凝 为什么啊
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1楼 2015-08-05 18:41:35
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
浓度多大啊
用的试剂浓度和质量保证吗


正常8%的浓缩胶也 不会特别容易坏
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2楼2015-08-05 22:07:32
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HTweiyi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是你的胶的交联剂少了，你看清楚你的配方，其中的试剂含量
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3楼2015-08-06 08:54:12
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673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶发软的原因可能有：
1.TEMED和APS加的量和比例不对
2.TEMED和APS失效了（尤其是APS 时间一长就很容易失效）
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4楼2015-08-06 10:11:17
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sheepshowzz

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
買哪家的啊?
配好的APS要1個月內使用完喔.
所以通常都是新鮮配置APS, 凝膠的效果會最好.
所以試劑盒的APS是粉末or?
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abcdogbitepig
5楼2015-08-06 10:12:30
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mimi_lala

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by linyingjia at 2015-08-05 22:07:32
浓度多大啊
用的试剂浓度和质量保证吗


正常8%的浓缩胶也 不会特别容易坏

分离是12% 浓缩5%啊
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6楼2015-08-06 15:21:21
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mimi_lala

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-06 10:11:17
胶发软的原因可能有：
1.TEMED和APS加的量和比例不对
2.TEMED和APS失效了（尤其是APS 时间一长就很容易失效）

APS是挺久的了。。。
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7楼2015-08-06 15:22:22
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dsh小代

木虫 (正式写手)

学生

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
25℃下，分离胶正常凝的时间在15分钟左右，浓缩料5-6分钟就能凝，楼主你的试剂盒哪个公司的？

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一切都是最好的安排，加油！
8楼2015-08-06 15:54:20
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dsh小代

木虫 (正式写手)

学生

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by dsh小代 at 2015-08-06 15:54:20
25℃下，分离胶正常凝的时间在15分钟左右，浓缩料5-6分钟就能凝，楼主你的试剂盒哪个公司的？

AP用的时候从冰箱里拿出来（最近一次AP在室温下放的时间长了点，大概30-1小时左右，再用的时候胶就凝的特别慢），楼主希望对你有帮助。

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一切都是最好的安排，加油！
9楼2015-08-06 15:58:38
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caco-2专家

新虫 (初入文坛)
TEMED和AP尤其重要，一般放在冰箱里。
而且，AP要在一周内用完，尽量现配现用。

估计是你的AP失效了。
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QQ 178085107
10楼2015-08-06 16:23:50
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