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1楼2015-08-03 16:09:14

haloarchaeon

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1、扩增细菌16SrRNA基因建议用27F和1541R,因为1541R能靶定3‘末端，可以得到比较长的16SrRNA基因，而1492R获得的产物比较短。
2、对于退火温度，我实验室常用55度。

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取个什么名啊

haloarchaeon

3楼2015-08-04 14:46:51

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feng37ye

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取个什么名啊: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-08-04 15:16:11

以Tm值低的那个数减去5度所得的值为初始退火温度，PCR后根据结果调整，多半是提高温度直到结果满意

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2楼2015-08-04 10:06:51

取个什么名啊

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3楼: Originally posted by haloarchaeon at 2015-08-04 14:46:51
1、扩增细菌16SrRNA基因建议用27F和1541R,因为1541R能靶定3‘末端，可以得到比较长的16SrRNA基因，而1492R获得的产物比较短。
2、对于退火温度，我实验室常用55度。

用你说的引物能得到多大的片段，我看的文献上一般用的都是1492R和27F

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5楼2015-08-04 15:18:30

取个什么名啊

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4楼: Originally posted by haloarchaeon at 2015-08-04 14:55:06
关于退火温度可以用“PCR引物（寡核苷酸）计算器”计算，以两条引物中低的Tm值为退火温度，如果有smear，可以提高温度。

我算了，两者差的还是很多

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6楼2015-08-04 15:18:54