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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 有关放线菌发酵液中活性物质分离
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dove2010

新虫 (正式写手)

[求助] 有关放线菌发酵液中活性物质分离 已有5人参与

发酵液中产生规则的多边形晶体状物质，水溶性极差，对于其中的活性物质分离，请大家给些建议，谢谢！
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1楼 2015-07-13 15:56:37
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lishuolin

铜虫 (小有名气)
可以考虑用微滤膜进行过滤
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2楼2015-07-13 17:00:35
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dove2010

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lishuolin at 2015-07-13 17:00:35
可以考虑用微滤膜进行过滤

微滤膜指的是0.22或0.45的膜吗？离心之后结晶物主要在沉淀中，很难用溶剂将其溶解和萃取出来。
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3楼2015-07-13 17:14:00
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microbhbu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-07-15 20:42:17
试试用水洗涤？好多沉淀是水溶性的；但不清楚楼主的沉淀是指的啥？或者用有机溶剂溶解后加水析出？通常的做法就是用各种不同极性的有机溶剂萃取，水溶性极差，那应该是有机溶剂可溶吧？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2015-07-14 09:25:34
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virty76

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌体收集，溶剂浸提
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5楼2015-07-14 16:24:48
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棘白菌素

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-07-15 20:42:30
工业上固液分离，通常是板框、甩虑，有机抽提，上柱子分离洗脱，浓缩，干燥，基本差不多了
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青春留不住，白发自然生！
6楼2015-07-14 17:03:46
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Micah1011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励新虫 2015-07-15 20:42:39
关键在于是什么，用晶体打个质谱，做做红外，有条件做nmr或者xrd，知道是什么才有价值

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每天叫醒我的不是闹钟，是梦想；每天让我做实验的不是老板，是兴趣
7楼2015-07-14 23:34:57
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dove2010

新虫 (正式写手)
谢谢各位楼主的回复。
前期经过固液分离、萃取、浓缩、干燥，取少量甲醇超声助溶，全波长紫外可见扫描显示该活性物质在340nm、357nm、378nm处有典型的吸收峰，HPLC检测也有较好的峰出来，本人未查到这三个吸收峰是哪类物质的典型特征，哪位高手能否给提供些相关信息。
各位楼主所说的我也在试，只是在固液分离前我一直想通过某种手段把晶体从菌丝体和残余培养基中分离出来，该晶体呈立体五边形、六边形等，特别漂亮，堪比钻石，在显微镜下闪亮发光，大小比放线菌的菌丝体大很多很多倍。目前得到的少量菌体甲醇浸提物干燥粉，用石油醚、正丁醇、乙酸乙酯等都无法溶解，后续试验在努力中。
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8楼2015-07-15 15:07:21
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发酵流程卡

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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zhang8826857: 金币+5, 鼓励新虫 2015-07-15 20:42:58
先利用有机溶剂（脂溶性）萃取，后浓缩，再进行物质活性检测，溶剂作参比。
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做最真实的自己
9楼2015-07-15 16:57:59
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Micah1011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by dove2010 at 2015-07-15 15:07:21
谢谢各位楼主的回复。
前期经过固液分离、萃取、浓缩、干燥，取少量甲醇超声助溶，全波长紫外可见扫描显示该活性物质在340nm、357nm、378nm处有典型的吸收峰，HPLC检测也有较好的峰出来，本人未查到这三个吸收峰是 ...

首先，紫外在四大光谱种的价值是最低的，而且你没有给出吸光系数加以判断。个人判断是苯基的概率较大其他说不清。推荐XRD秒杀，能得到晶体绝对构型。不然至少有红外，质谱才能判断，当然，你也可以做鉴别反应，可以去看看药物分析和波谱解析

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每天叫醒我的不是闹钟，是梦想；每天让我做实验的不是老板，是兴趣
10楼2015-07-17 21:10:33
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