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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 放线菌分离纯化时不长怎么办
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myapple1989

铁虫 (小有名气)

[求助] 放线菌分离纯化时不长怎么办

我一直在做土壤放线菌的分离纯化工作，开始时把土壤菌悬液稀释成不同的梯度，涂在分离平板上，培养一段时间后可以明显看见长出放线菌了，但在纯化时把起初长出来的放线菌接种到新的培养基时，培养一段时间之后，观察，发现分离的放线菌都没长出来，都不知道怎么回事，关于这个问题，我也咨询了不少的人，说是有的放线菌不易生长，需要进行摇床培养一段时间，待长出菌丝球之后再用发酵液进行划线分离，这种办法我试过了，还是不可以，画完线培养一段时间之后，里面长的都是细菌，不知道有哪位大神是做这方面的工作的，有啥好的办法，可以分享下，我在这表示万分的感谢！
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1楼 2013-05-03 14:34:05
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

fangyuanpan

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myapple1989: 金币+5, ★有帮助 2013-05-04 10:17:26
laozuzunzhe: 金币+3, good！ 2013-05-05 21:07:03
我也分离过 没有出现不长的呀 你用的什么培养基 培养基除了和之前的分离培养基抗生素方面有差别外 其他条件尽量一致 还有 很可能是你挑菌的时候没挑到 所以划线才不长
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2楼2013-05-03 22:10:07
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myapple1989

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 厦大海生 at 2013-10-04 16:13:19
你好，请问如何从板上分辨哪些是细菌哪些是放线菌？？除了菌丝以外。我本科学工程的，现在研究微生物，很是木基础。。谢谢...

主要有两点区别：1.细菌的菌落从表面上看明显是比较湿的，但放线菌的菌落看起来就比较干了，但有些放线菌的菌落也比较湿，但它应该像果冻那样的才是，2.细菌和培养基结合的不紧密，有接种环一划就和培养基分看了，但放线菌就和培养基结合的比较紧密，就算你 划一下，但在培养基里明显看到还有基内菌丝，主要就这两点，其他的要靠个人的经验了，分的菌多了，自然就这道了
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12楼2013-11-04 09:43:33
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chengjg

木虫 (正式写手)
嗯 再试试呗，不过我发现放线菌适应能力很差，稍微改变一下培养基成分就不长了，很脆弱啊。
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4楼2013-05-04 08:25:02
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金奇2621

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我现在也是做放线菌筛选，出现和你相同的情况，后来改用液体培养法，效果不错。
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动力你是你给的！
8楼2013-05-25 18:52:34
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

我们实验室一般培养放线菌用international streptomyces project(ISP) 2培养基
配方如下：1L去离子水中加入，酵母提取物4g,麦芽粉5g,葡萄糖4g，（只是培养可不加这两个：微量盐溶液1ml,复合微生物少许），我觉得放线菌是我手中菌里最好养的了，而且保种也相当方便啊。
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11楼2013-11-03 22:30:12
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普通回帖

良民

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myapple1989: 金币+3, ★有帮助 2013-05-04 10:18:07
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助交流！ 2013-05-05 21:06:42
首先你划出来的都是细菌，只能说你染菌了，不能说明这个方法不行！再试试，说不定就可以了！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2013-05-04 06:41:25
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myapple1989

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fangyuanpan at 2013-05-03 22:10:07
我也分离过 没有出现不长的呀 你用的什么培养基 培养基除了和之前的分离培养基抗生素方面有差别外 其他条件尽量一致 还有 很可能是你挑菌的时候没挑到 所以划线才不长

我一般用的培养基基本上都是ATCC172，SIM和GAA，而且分离时是用的白色枪头直接把那个菌落挑下来，再在另一个培养基上划线的
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5楼2013-05-04 10:16:47
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flightty

木虫 (正式写手)
楼主说分离后发现长防线菌了，有显微镜观察的确是放线菌么。如果初始平板能长，再分离不长说明你分到的菌可能有相互依赖。
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6楼2013-05-05 09:59:22
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myapple1989

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by flightty at 2013-05-05 09:59:22
楼主说分离后发现长防线菌了，有显微镜观察的确是放线菌么。如果初始平板能长，再分离不长说明你分到的菌可能有相互依赖。

那有相互依赖性应该怎么来处理呢？
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7楼2013-05-07 12:54:47
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厦大海生

新虫 (初入文坛)
你好，我最近在分离海绵里面的放线菌，用的ISP2培养基，目前板上长了很多菌，请问我如何分辨哪些是放线菌呢？是看有无菌丝吗？
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9楼2013-10-04 16:11:16
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厦大海生

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fangyuanpan at 2013-05-03 22:10:07
我也分离过 没有出现不长的呀 你用的什么培养基 培养基除了和之前的分离培养基抗生素方面有差别外 其他条件尽量一致 还有 很可能是你挑菌的时候没挑到 所以划线才不长

你好，请问如何从板上分辨哪些是细菌哪些是放线菌？？除了菌丝以外。我本科学工程的，现在研究微生物，很是木基础。。谢谢
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10楼2013-10-04 16:13:19
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