应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 感受态细胞制备
51/1返回列表
查看: 2036  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xinyou519

新虫 (初入文坛)

[求助] 感受态细胞制备 已有4人参与

各位虫友，大家在制备感受态细胞的时候最后一步Cacl2和甘油是如何加的？我的做法是用100mmol的Cacl2溶解沉淀然后加入相同体积的30%甘油，这样制成的感受态细胞，甘油浓度最终是15%，但是Cacl2浓度却降到了50mmol，是不是浓度太低呢？大家在实验中是如何做的？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-07-09 22:01:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ppppppppp

新虫 (小有名气)
直接配成0.1M的氯化钙甘油水溶液啊，然后灭菌。多方便啊。。。
赞一下 回复此楼
初来乍到，请多指教
6楼2015-07-10 23:15:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-10 21:00:40
溶解沉淀？那还有感受态吗？我这边用50%甘油。用活力好的菌株，纯的试剂，这个效率就上去了

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-07-10 05:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiqinger

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-10 21:00:54
850ul 的Cacl和150 ul的甘油先混合，再重悬细胞沉淀。
赞一下 回复此楼
123456
3楼2015-07-10 08:32:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-07-10 21:01:06
我们实验室的方法是用2mL预冷的0.1mol/L的CaCl2 溶液，轻轻悬浮细胞，然后加2ml 50%的甘油，然后分装冻存就可以了，每次的效率都很好，但我们实验室的老板说感受态最好在一周之内用，过了一周效率就降低了
赞一下(2人) 回复此楼
医学&统计学
4楼2015-07-10 15:55:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭