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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 感受态细胞制备
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笑小芗屮

铁虫 (初入文坛)

[求助] 感受态细胞制备 已有2人参与

感受态细胞制备时的CaCl2浓度，有说是0.1mol/L，比如《分子克隆》，有说是0.05mol/L。到底哪个好？
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1楼 2014-10-27 14:43:17
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-27 19:14:54
笑小芗屮: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-10-31 12:08:14
感受态细胞制备时，我们配两种不同浓度的CaCl2，一种是0.1mol/l的（与细胞渗透压相等），不加甘油，一种是0.05mol/l（低渗溶液）的，加甘油，用于感受态细胞的保存
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···
2楼2014-10-27 14:54:51
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笑小芗屮

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小冀- at 2014-10-27 14:54:51
感受态细胞制备时，我们配两种不同浓度的CaCl2，一种是0.1mol/l的（与细胞渗透压相等），不加甘油，一种是0.05mol/l（低渗溶液）的，加甘油，用于感受态细胞的保存

我查了资料，用的是20mmol/L的CaCl2和80mmol/L的MgCl2,这样应该还是与细胞渗透压一样吧？
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3楼2014-10-31 12:08:04
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by 笑小芗屮 at 2014-10-31 12:08:04
我查了资料，用的是20mmol/L的CaCl2和80mmol/L的MgCl2,这样应该还是与细胞渗透压一样吧？...

应该吧，不太清楚
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···
4楼2014-10-31 12:25:16
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厚德求是

金虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-10-31 13:45:49
我和你讲，感受态细胞制备直接去买试剂盒。早先我和你一样想着自己制备感受态细胞，什么氯化钙啊，超级感受态啊我都做过，但是最后的转化效率都没有买来的那个感受态试剂盒做出来的好，真心的。我用的是ta**ra公司的感受态制备试剂盒，你也可以去用一下，真心的，我不是他们公司的，只是不想你也走弯路。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2014-10-31 13:43:25
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厚德求是

金虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

【答案】应助回帖

才100多块钱，太便宜了好吗...

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2014-10-31 13:47:54
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很很大虫子字

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 厚德求是 at 2014-10-31 13:47:54
才100多块钱，太便宜了好吗...

你能把那个试剂盒公司的全名告诉我吗，我也在准备做感受态细胞，而且我做的是枯草芽孢杆菌的，你说的那个公司生产这种你能处理芽孢杆菌的吗
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7楼2014-11-07 11:15:17
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厚德求是

金虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 很很大虫子字 at 2014-11-07 11:15:17
你能把那个试剂盒公司的全名告诉我吗，我也在准备做感受态细胞，而且我做的是枯草芽孢杆菌的，你说的那个公司生产这种你能处理芽孢杆菌的吗...

是takara的，你稍微搜一下。这个好像是制备大肠的，但是我并不完全确定,你查一下看看。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2014-11-08 00:01:37
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笑小芗屮

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 厚德求是 at 2014-11-08 00:01:37
是takara的，你稍微搜一下。这个好像是制备大肠的，但是我并不完全确定,你查一下看看。
...

我之前做过枯草芽孢的感受态，那个比较难，是现在现用的。
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9楼2015-01-04 12:20:24
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