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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 跪求293T细胞！！！
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chenshavs

新虫 (初入文坛)

[求助] 跪求293T细胞！！！ 已有2人参与

最近正在进行慢病毒包装，293T细胞不给力，跪求大神赐点293T细胞！！！！
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1楼 2015-07-08 20:26:07
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蓝日星空

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 蓝日星空 at 2015-07-09 09:10:31
我们公司有293T细胞http://www.hwatao.com/

可以加一下QQ:857926071
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3楼2015-07-09 09:14:44
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蓝日星空

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们公司有293T细胞http://www.hwatao.com/
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2楼2015-07-09 09:10:31
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蓝日星空

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

Sf9细胞生长条件：27℃、无需CO2、既可悬浮生长也可贴壁生长、培养基SF-900Ⅱ（无血清）。悬浮培养时把细胞在悬浮培养瓶中，要有滚动装置（若无上述装置可把培养瓶放在小摇床上<200rpm摇振陪养）。贴壁培养时可把细胞在悬浮培养瓶中直接静置30-60分钟即可贴壁，传代时不用消化，用吸管轻轻吹打即可使细胞脱落下来，一般三天传一次代。
就我个人经验，悬浮培养更方便，细胞生长状态也不错。尤其对刚复苏的细胞最好先进行悬浮培养。待细胞长满或需要细胞时，用吸管把细胞吸入离心管中，1000转离心5分钟，然后弃掉上清，用手指将离心管中的细胞弹打均匀，加新培养基，吹打均匀即可分到另外一瓶中。原来瓶中可再加新培养基继续摇振陪养。
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4楼2015-07-09 10:58:23
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蓝日星空

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1．293T细胞不宜长期传代，细胞比较容易变老，建议每传一次代就冻存一部分细胞，传代比例以1：3——1：4为宜。像楼上1：20传代虽然可以减少传代次数，但细胞缺少相互作用，生长会比适宜密度的时候慢，而且很容易老化．
２．用于包装病毒或者转染的细胞应该用代数较早生长旺盛，胞体饱满状态好的．特别是应该用gelatin或者多聚赖氨酸铺底，一方面细胞在操作过程中不易成片漂起，另一方面基质成分有利于细胞帖附生长．
３．胰酶作用完全有利于下一代生长，不要心急将细胞吹起，而是轻微晃动培养瓶细胞逐渐下来的时候最好．
４．293T对L-glu要求不高，２mM就行．
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5楼2015-07-10 09:51:55
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