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chenshavs

新虫 (初入文坛)

[求助] 跪求293T细胞!!! 已有2人参与

最近正在进行慢病毒包装,293T细胞不给力,跪求大神赐点293T细胞!!!!
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蓝日星空

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们公司有293T细胞http://www.hwatao.com/
2楼2015-07-09 09:10:31
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蓝日星空

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 蓝日星空 at 2015-07-09 09:10:31
我们公司有293T细胞http://www.hwatao.com/

可以加一下QQ:857926071
3楼2015-07-09 09:14:44
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蓝日星空

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

Sf9细胞生长条件:27℃、无需CO2、既可悬浮生长也可贴壁生长、培养基SF-900Ⅱ(无血清)。悬浮培养时把细胞在悬浮培养瓶中,要有滚动装置(若无上述装置可把培养瓶放在小摇床上<200rpm摇振陪养)。贴壁培养时可把细胞在悬浮培养瓶中直接静置30-60分钟即可贴壁,传代时不用消化,用吸管轻轻吹打即可使细胞脱落下来,一般三天传一次代。
就我个人经验,悬浮培养更方便,细胞生长状态也不错。尤其对刚复苏的细胞最好先进行悬浮培养。待细胞长满或需要细胞时,用吸管把细胞吸入离心管中,1000转离心5分钟,然后弃掉上清,用手指将离心管中的细胞弹打均匀,加新培养基,吹打均匀即可分到另外一瓶中。原来瓶中可再加新培养基继续摇振陪养。
4楼2015-07-09 10:58:23
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蓝日星空

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1.293T细胞不宜长期传代,细胞比较容易变老,建议每传一次代就冻存一部分细胞,传代比例以1:3——1:4为宜。像楼上1:20传代虽然可以减少传代次数,但细胞缺少相互作用,生长会比适宜密度的时候慢,而且很容易老化.
2.用于包装病毒或者转染的细胞应该用代数较早生长旺盛,胞体饱满状态好的.特别是应该用gelatin或者多聚赖氨酸铺底,一方面细胞在操作过程中不易成片漂起,另一方面基质成分有利于细胞帖附生长.
3.胰酶作用完全有利于下一代生长,不要心急将细胞吹起,而是轻微晃动培养瓶细胞逐渐下来的时候最好.
4.293T对L-glu要求不高,2mM就行.
5楼2015-07-10 09:51:55
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HTweiyi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
内容已删除
6楼2015-07-10 12:58:31
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