24小时热门版块排行榜    

查看: 1752  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

qaz139687

新虫 (小有名气)

[求助] TA克隆相关问题 已有8人参与

PCR产物用PMD 19T载体  16℃过夜连接后,与DH5感受态细胞转化,涂平板,挑菌,液体培养基培养后,菌液变浑浊,然后做了菌落PCR有目的条带,送公司测序,公司说菌落浓度太低,这是为什么?是我感受态的问题吗
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qaz139687

新虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 表弟爱网游 at 2015-07-06 18:35:58
你可以直接送平板,让他们帮你挑斑测序。
也可以自己摇10个小时,菌液浑浊了,送2ml菌液直接抽质粒测序。
或者偷懒,只摇2小时,很澄清的送样,让他们继续摇,然后抽提测序。
价格都是一样的,不要问我怎么知道的 ...

好吧,那我做菌液培养的时候只用2ml的离心管加800ml的amp+液体培养基,会不会太小了,要不要换成10ml的试管?
14楼2015-07-06 19:54:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

qaz139687

新虫 (小有名气)

来个人指点指点啊
2楼2015-07-05 13:25:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与,应助指数 +1
公司可以帮你转化了之后再抽提质粒测序的,估计是他们不愿意
3楼2015-07-05 14:42:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ppppppppp

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
送测序的菌需要继续培养的,只是浑浊肯定不行,因为他们也要先抽质粒再测序的。菌落pcr和测序对菌浓度要求应该不一样的。
初来乍到,请多指教
4楼2015-07-05 14:56:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见