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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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qaz139687

新虫 (小有名气)

[求助] TA克隆相关问题已有8人参与

PCR产物用PMD 19T载体  16℃过夜连接后,与DH5感受态细胞转化,涂平板,挑菌,液体培养基培养后,菌液变浑浊,然后做了菌落PCR有目的条带,送公司测序,公司说菌落浓度太低,这是为什么?是我感受态的问题吗
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表弟爱网游

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以直接送平板,让他们帮你挑斑测序。
也可以自己摇10个小时,菌液浑浊了,送2ml菌液直接抽质粒测序。
或者偷懒,只摇2小时,很澄清的送样,让他们继续摇,然后抽提测序。
价格都是一样的,不要问我怎么知道的,我以前做测序最讨厌第三种
当一切如飞舞的落叶坠落,惋惜之余,也要学会原谅与释怀
13楼2015-07-06 18:35:58
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qaz139687

新虫 (小有名气)

来个人指点指点啊
2楼2015-07-05 13:25:08
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a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与,应助指数 +1
公司可以帮你转化了之后再抽提质粒测序的,估计是他们不愿意
3楼2015-07-05 14:42:12
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ppppppppp

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
送测序的菌需要继续培养的,只是浑浊肯定不行,因为他们也要先抽质粒再测序的。菌落pcr和测序对菌浓度要求应该不一样的。
初来乍到,请多指教
4楼2015-07-05 14:56:56
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