应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 第一次用PI法测细胞凋亡，求大家指点...！
61/1返回列表
查看: 1744  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Laure629

新虫 (初入文坛)

[求助] 第一次用PI法测细胞凋亡，求大家指点...！ 已有2人参与

偶按文献上的浓度，用咪喹莫特给角质形成细胞系给药，诱导它凋亡，再用PI法测流式。
由于咪喹莫特是乳膏，给药时用DMSO+DMEM溶解的...可是显微镜下看发现含有药的培养基里有许多黑色小颗粒，培养基像悬浊液一样，是不是药物木有溶解完全，会影响实验嘛...?
24小时后，观察到给药组大量细胞凋亡溶解，收集细胞做PI染色时，每到用PBS离心清洗细胞的步骤时，细胞都会少好多啊，最后细胞直接没有了！！是不是我收集细胞太晚了，细胞太脆弱，一碰就碎的原因....?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-07-03 14:24:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

徐州往事

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
Laure629(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-19 20:07:06
Laure629: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢啦！ 2015-08-03 14:37:14
收集细胞时，上清一定要离心收细胞，当细胞凋亡时，细胞会呈悬浮或者漂浮状态。如果你把上清弃去，那么凋亡细胞都被扔掉了。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-07-17 15:17:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★ ★
Laure629: 金币+2, ★★★很有帮助, 感谢感谢！ 2015-08-03 14:37:40
本帖内容被屏蔽
3楼2015-07-19 11:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dumbooo

新虫 (初入文坛)
染细胞用的板子要是V型的，最好是那种不容易粘细胞的，而且要调整离心机转数，弃上清的时候不能抖，要一次甩干净；另外也有可能是你的imiquimod浓度比较高，导致细胞凋亡，或者细胞污染或状态不佳，染色时细胞的确会变少，但不至于没有；PI染色需要用滤网过滤，避免堵塞机器，不知道你有没有做，你要从头到尾回忆几遍有可能是哪里出了问题，或者是多方面的问题，最后提醒你PI有毒，记得戴口罩，我也经验不足，仅作参考
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-07-19 21:35:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永远的笑莲

铁虫 (初入文坛)
试用PI染色进行新报凋亡的测定的时候，你用的这个过程提过复杂。经过的流程过多。程序太多，细胞就越是脆弱，再就是流式细胞仪对细胞的损害较大。最好运用专门的检测设备。现在这样的设备还蛮多的。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-07-27 11:54:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永远的笑莲

铁虫 (初入文坛)
或者你可以试试运用Annexin-V双染法，效果更佳。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2015-07-27 11:57:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Laure629 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +3 YXCT 2026-03-01 3/150 2026-03-01 19:51 by 无懈可击111
[考研] 材料化工调剂 +10 今夏不夏 2026-03-01 11/550 2026-03-01 19:49 by 无懈可击111
[考研] 0805总分292，求调剂 +5 幻想之殇 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无懈可击111
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:11 by 海嵙Y
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博！
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 0856求调剂285 +8 吕仔龙 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by 刘兵
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 化工专硕342，一志愿大连理工大学，求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 284求调剂 +6 天下熯 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:19 by Ducount.Y
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭