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songzuowei

木虫 (著名写手)


[交流] 电转化大肠杆菌转化效率低怎么办?

最近在做电转化大肠杆菌,可是转化效率老是上不去,有没有虫子指点一下,必有重谢(金币)!
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)



songzuowei(金币+1): 谢谢参与
用氯化钙法做感受态不行吗。。
9楼2015-07-10 16:41:27
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Neo2000

木虫 (著名写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
songzuowei: 金币+2, 谢谢!菌株也换了 估计还是我操作细节不太行 2015-06-26 08:45:50
换菌株试试,菌株老化了很常见

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-06-25 11:39:59
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liubx1006

银虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
songzuowei: 金币+5, 好的,我试试,谢谢! 2015-06-26 08:47:37
做感受态最重要的是菌的状态,你可以划线后再重新挑单克隆试试,转接后低温18°摇至0D600约0.4,那样做出来的感受态肯定没问题的。
3楼2015-06-25 18:44:33
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qq263671900

银虫 (初入文坛)


★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
songzuowei: 金币+5, 好的,谢谢! 2015-06-26 08:48:22
在做transforming的时候,全程细菌是要待在ice bath里面的,我建议你给我们看看你的protocol,还有菌种的选择和plasmid的类型吻合吗?这个可以从生物公司上找到答案。对了,一定要用高纯度水,盐分太多会有火花,这个很影响转化结果
4楼2015-06-26 06:46:56
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简单回复
2016-11-10 06:38   回复  
songzuowei(金币+1): 谢谢参与
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