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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电转化大肠杆菌转化效率低怎么办？
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songzuowei

木虫 (著名写手)

[交流] 电转化大肠杆菌转化效率低怎么办？

最近在做电转化大肠杆菌，可是转化效率老是上不去，有没有虫子指点一下，必有重谢（金币）！
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1楼 2015-06-25 09:58:11
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)
★
songzuowei(金币+1): 谢谢参与
用氯化钙法做感受态不行吗。。
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9楼2015-07-10 16:41:27
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Neo2000

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
songzuowei: 金币+2, 谢谢！菌株也换了 估计还是我操作细节不太行 2015-06-26 08:45:50
换菌株试试，菌株老化了很常见

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2楼2015-06-25 11:39:59
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liubx1006

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
songzuowei: 金币+5, 好的，我试试，谢谢！ 2015-06-26 08:47:37
做感受态最重要的是菌的状态，你可以划线后再重新挑单克隆试试，转接后低温18°摇至0D600约0.4，那样做出来的感受态肯定没问题的。
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3楼2015-06-25 18:44:33
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qq263671900

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
songzuowei: 金币+5, 好的，谢谢！ 2015-06-26 08:48:22
在做transforming的时候，全程细菌是要待在ice bath里面的，我建议你给我们看看你的protocol，还有菌种的选择和plasmid的类型吻合吗？这个可以从生物公司上找到答案。对了，一定要用高纯度水，盐分太多会有火花，这个很影响转化结果
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4楼2015-06-26 06:46:56
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梦想天行11楼
2016-11-10 06:38   回复  
songzuowei(金币+1): 谢谢参与
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