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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电转化大肠杆菌转化效率低怎么办？
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songzuowei

木虫 (著名写手)

[交流] 电转化大肠杆菌转化效率低怎么办？

最近在做电转化大肠杆菌，可是转化效率老是上不去，有没有虫子指点一下，必有重谢（金币）！
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1楼 2015-06-25 09:58:11
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liubx1006

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
songzuowei: 金币+5, 好的，我试试，谢谢！ 2015-06-26 08:47:37
做感受态最重要的是菌的状态，你可以划线后再重新挑单克隆试试，转接后低温18°摇至0D600约0.4，那样做出来的感受态肯定没问题的。
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3楼2015-06-25 18:44:33
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)
★
songzuowei(金币+1): 谢谢参与
用氯化钙法做感受态不行吗。。
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9楼2015-07-10 16:41:27
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Neo2000

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
songzuowei: 金币+2, 谢谢！菌株也换了 估计还是我操作细节不太行 2015-06-26 08:45:50
换菌株试试，菌株老化了很常见

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2楼2015-06-25 11:39:59
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qq263671900

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
songzuowei: 金币+5, 好的，谢谢！ 2015-06-26 08:48:22
在做transforming的时候，全程细菌是要待在ice bath里面的，我建议你给我们看看你的protocol，还有菌种的选择和plasmid的类型吻合吗？这个可以从生物公司上找到答案。对了，一定要用高纯度水，盐分太多会有火花，这个很影响转化结果
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4楼2015-06-26 06:46:56
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阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★
songzuowei: 金币+2, 谢谢！ 2015-06-26 08:48:07
路过的看了一下，帮顶，祝福你好运！~~~~~~~~~~~~~~~~~~
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5楼2015-06-26 08:24:27
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JDSW

新虫 (初入文坛)
加点氯化钾试试
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6楼2015-06-26 15:46:39
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songzuowei

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by JDSW at 2015-06-26 15:46:39
加点氯化钾试试

SOC里面有氯化钾啊
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7楼2015-06-29 08:39:04
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songzuowei

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by halfbeer at 2015-07-10 16:41:27
用氯化钙法做感受态不行吗。。

不行的吧 里面有离子 电转容易爆杯的 而且两者的原理也不一样
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10楼2015-07-11 13:23:47
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zhaoxinhao

新虫 (小有名气)
★
songzuowei(金币+1): 谢谢参与
我也来学习一下

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12楼2016-11-10 07:54:24
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MAS_rice

至尊木虫 (著名写手)
★
songzuowei(金币+1): 谢谢参与
我电转化效率也不高，然后我就放弃了电转化，改用化学转化啦

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14楼2017-05-03 21:01:20
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songzuowei8楼
2015-07-10 14:41   回复  
梦想天行11楼
2016-11-10 06:38   回复  
songzuowei(金币+1): 谢谢参与
， 发自小木虫Android客户端
songzuowei13楼
2017-05-03 17:37   回复  
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