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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请问加了loading buffer的产物还能进行二次pcr吗
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天使的茶

铁虫 (小有名气)

[求助] 请问加了loading buffer的产物还能进行二次pcr吗 已有8人参与

本来想二次pcr的，但是不小心全部产物都加loading buffer了，模版也全没了，请问加了loading buffer的产物还能进行二次pcr吗
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无
1楼 2015-06-21 20:23:50
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siriusxuan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-24 22:52:39
Loading buffer 一般10*的都带EDTA或者SDS这种就不能再用了，只能跑胶回收片段来做。6*的和MIX里面的loading buffer不含这两种成分，所以可以直接做，但最好还是建议胶回收之后再做。
赞一下(1人) 回复此楼
此座可言轻社稷，江山万里起风尘。
6楼2015-06-23 14:28:59
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dxh86412

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-22 22:50:52
跑下胶，纯化下，二次pcr最总要的是模板一定要稀释，至少200倍~
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2楼2015-06-22 02:11:34
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dxh86412

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-24 22:52:14
最好跑下胶，纯化下。其实按理说，loading buffer对PCR是没有抑制作用的，二次pcr的话，一定要稀释模板，最少200倍~
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3楼2015-06-22 02:14:29
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duan1987

铁杆木虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-22 22:51:13
可以的，买的mix不都是带loading buffer的么？
赞一下(2人) 回复此楼
相信爱的年纪，没能唱给你的歌曲，让我一生中常常追忆…
4楼2015-06-22 16:14:27
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