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hxx593847830

新虫 (小有名气)

[求助] 土壤筛菌、分离纯化 已有9人参与

各位大神好,微生物新人请教几个问题:我现在做土壤筛菌,通过固体平板法和液体富集驯化法筛出了菌株,对这两种方法筛出的菌株做了大量的平板划线,我怎么样确定几个平板之间是不是同一株菌?仅仅是看菌落外观么?我现在仅仅需要初步分离,之后会做复筛,生理生化以及16SrDNA!谢谢啦—
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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hxx593847830: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-06-17 11:00:42
还是先从形态外观直接观察,大致分类,也可以用染色法,确定是阴性还是阳性菌,然后做生理生化分析,基本可以判断是不是一个属种的;最后在做16S鉴定和系统发育分析,就差不多了
严于律己,宽以待人
2楼2015-06-16 20:19:36
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☆季节→永恒

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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hxx593847830: 金币+5, 有帮助 2015-06-17 11:01:56
我一般都是先按表象分类,再用酶切16时,验证表观是否是一类。最后在测序

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2015-06-17 00:09:07
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yangweiweiwq

新虫 (初入文坛)

以前做过微生物的采集分离纯化,针对自己需要的细菌配制特定的的培养基,采集土壤用无菌水溶解稀释,在固体培养基上涂布培养。显微镜选择需要的细菌,采集华线培养。反复多次划线培养后,直至纯化。配制液体培养基,接种,恒温摇床震荡培养。离心,水洗,获得大量细菌,破碎获得质粒DNA。
6楼2015-06-17 10:25:26
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墨瓣

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先做生理生化看看

[ 发自小木虫客户端 ]
尽人事,安天命
4楼2015-06-17 07:40:27
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ccdbaobao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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hxx593847830: 金币+5, 有帮助 2015-06-17 10:59:17
一般都是先从菌落形态大致区分、排重,然后再复筛的
5楼2015-06-17 08:37:51
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2658509

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这是做的什么实验,为了达到什么目的

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-06-17 10:29:31
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liuhl521

禁虫 (初入文坛)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

12楼2015-06-17 11:09:43
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ccdbaobao

银虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hxx593847830 at 2015-06-17 11:00:11
我之前也是这样想的,先大致区分,可是这样会不会丢失好多有用的菌株?!现在总是会担心这个...

会有一定的丢失的,若实在不放心,可以将纯化出来的菌落全部拿去测序(嘿嘿,经费允许的情况下)
13楼2015-06-17 14:58:48
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大咖小蛊

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先富集培养再用特定培养基进行初筛和复筛,划线纯化观察形态,在进行液态培养凃平板,测序鉴定和保藏。
15楼2015-06-18 09:26:47
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songbingna

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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我之前做的时候就是先看1沦落形态,初步分类,然后理化再做的

[ 发自小木虫客户端 ]
comeonbaby
19楼2015-06-19 06:54:43
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liuhl521

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

20楼2015-06-19 15:15:08
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cxw0534

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by hxx593847830 at 2015-06-17 10:58:41
环境微生物,筛选特定农药降解菌——...

如果是仅仅为了区分,可以直接将表征特性接近或者相同的进行16S,如果有筛选的特定用处,建议开始时就开始功能性质的筛选
21楼2015-06-20 18:07:40
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普通回帖

hxx593847830

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 2658509 at 2015-06-17 10:29:31
这是做的什么实验,为了达到什么目的

环境微生物,筛选特定农药降解菌——
8楼2015-06-17 10:58:41
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hxx593847830

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ccdbaobao at 2015-06-17 08:37:51
一般都是先从菌落形态大致区分、排重,然后再复筛的

我之前也是这样想的,先大致区分,可是这样会不会丢失好多有用的菌株?!现在总是会担心这个
9楼2015-06-17 11:00:11
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hxx593847830

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 最爱花诗雨 at 2015-06-16 20:19:36
还是先从形态外观直接观察,大致分类,也可以用染色法,确定是阴性还是阳性菌,然后做生理生化分析,基本可以判断是不是一个属种的;最后在做16S鉴定和系统发育分析,就差不多了

谢谢
10楼2015-06-17 11:00:30
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