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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 土壤筛菌、分离纯化
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hxx593847830

新虫 (小有名气)

[求助] 土壤筛菌、分离纯化 已有9人参与

各位大神好，微生物新人请教几个问题：我现在做土壤筛菌，通过固体平板法和液体富集驯化法筛出了菌株，对这两种方法筛出的菌株做了大量的平板划线，我怎么样确定几个平板之间是不是同一株菌？仅仅是看菌落外观么？我现在仅仅需要初步分离，之后会做复筛，生理生化以及16SrDNA!谢谢啦—
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1楼 2015-06-16 17:30:27
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hxx593847830: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-06-17 11:00:42
还是先从形态外观直接观察，大致分类，也可以用染色法，确定是阴性还是阳性菌，然后做生理生化分析，基本可以判断是不是一个属种的；最后在做16S鉴定和系统发育分析，就差不多了
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严于律己，宽以待人
2楼2015-06-16 20:19:36
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☆季节→永恒

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hxx593847830: 金币+5, ★有帮助 2015-06-17 11:01:56
我一般都是先按表象分类，再用酶切16时，验证表观是否是一类。最后在测序

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2015-06-17 00:09:07
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yangweiweiwq

新虫 (初入文坛)
以前做过微生物的采集分离纯化，针对自己需要的细菌配制特定的的培养基，采集土壤用无菌水溶解稀释，在固体培养基上涂布培养。显微镜选择需要的细菌，采集华线培养。反复多次划线培养后，直至纯化。配制液体培养基，接种，恒温摇床震荡培养。离心，水洗，获得大量细菌,破碎获得质粒DNA。
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6楼2015-06-17 10:25:26
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墨瓣

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先做生理生化看看

[ 发自小木虫客户端 ]
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尽人事，安天命
4楼2015-06-17 07:40:27
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ccdbaobao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hxx593847830: 金币+5, ★有帮助 2015-06-17 10:59:17
一般都是先从菌落形态大致区分、排重，然后再复筛的
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5楼2015-06-17 08:37:51
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2658509

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这是做的什么实验，为了达到什么目的

[ 发自小木虫客户端 ]
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7楼2015-06-17 10:29:31
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liuhl521

禁虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
12楼2015-06-17 11:09:43
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ccdbaobao

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hxx593847830 at 2015-06-17 11:00:11
我之前也是这样想的，先大致区分，可是这样会不会丢失好多有用的菌株？！现在总是会担心这个...

会有一定的丢失的，若实在不放心，可以将纯化出来的菌落全部拿去测序（嘿嘿，经费允许的情况下）
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13楼2015-06-17 14:58:48
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大咖小蛊

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先富集培养再用特定培养基进行初筛和复筛，划线纯化观察形态，在进行液态培养凃平板，测序鉴定和保藏。
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15楼2015-06-18 09:26:47
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songbingna

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我之前做的时候就是先看1沦落形态，初步分类，然后理化再做的

[ 发自小木虫客户端 ]
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comeonbaby
19楼2015-06-19 06:54:43
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liuhl521

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
20楼2015-06-19 15:15:08
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cxw0534

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by hxx593847830 at 2015-06-17 10:58:41
环境微生物，筛选特定农药降解菌——...

如果是仅仅为了区分，可以直接将表征特性接近或者相同的进行16S，如果有筛选的特定用处，建议开始时就开始功能性质的筛选
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21楼2015-06-20 18:07:40
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普通回帖

hxx593847830

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 2658509 at 2015-06-17 10:29:31
这是做的什么实验，为了达到什么目的

环境微生物，筛选特定农药降解菌——
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8楼2015-06-17 10:58:41
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hxx593847830

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ccdbaobao at 2015-06-17 08:37:51
一般都是先从菌落形态大致区分、排重，然后再复筛的

我之前也是这样想的，先大致区分，可是这样会不会丢失好多有用的菌株？！现在总是会担心这个
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9楼2015-06-17 11:00:11
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hxx593847830

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 最爱花诗雨 at 2015-06-16 20:19:36
还是先从形态外观直接观察，大致分类，也可以用染色法，确定是阴性还是阳性菌，然后做生理生化分析，基本可以判断是不是一个属种的；最后在做16S鉴定和系统发育分析，就差不多了

谢谢
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10楼2015-06-17 11:00:30
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