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大白杨

银虫 (小有名气)

[求助] 如何检测神经干细胞中某基因mRNA的表达量

是先提出细胞的总RNA,然后通过相应的RNA引物反转录成需要的DNA片段,最后通过PCR反应定量吗?求比较详细的操作步骤,最好是列出了实验前准备工作的。没人教,不知道应该怎么上手
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

没错,先是培养细胞,然后用试剂盒抽提总mRna,然后反转录成cDna,用试剂盒带的随机引物就可以了。然后根据你的基因设计RT-PCR引物。选择好内参,一般都是actin之类的。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-06-08 19:32:07
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

最好直接买用depc处理过的水和枪头,否则自己处理,那玩意有毒。。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-06-08 19:33:10
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大白杨

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by guoqin_shiyin at 2015-06-08 19:33:10
最好直接买用depc处理过的水和枪头,否则自己处理,那玩意有毒。。。。

4楼2015-06-08 20:31:14
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