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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 荧光素酶的检测
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fxj33102013

新虫 (小有名气)

[求助] 荧光素酶的检测 已有2人参与

想检测一下荧光素酶活性，网上说M5酶标仪可以，但是不知道具体的操作方法，哪位
大神可以可以告知，感激不尽！
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Iknowsomeoneintheworldiswaitingforme,althoughI'venoideaofwhoheis.ButIfeelhappyeverydayforthis.
1楼 2015-06-02 20:22:38
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xmcliulei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同学是做luciferase assay么？
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2楼2015-06-02 21:42:17
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
普洛麦格有试剂盒

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天道酬勤
3楼2015-06-02 22:51:30
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fxj33102013

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xmcliulei at 2015-06-02 21:42:17
同学是做luciferase assay么？

是的
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Iknowsomeoneintheworldiswaitingforme,althoughI'venoideaofwhoheis.ButIfeelhappyeverydayforthis.
4楼2015-06-03 09:35:24
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fxj33102013

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-06-02 22:51:30
普洛麦格有试剂盒

买的是promega的rabbit reticulocyte lysates，我做的蛋白对核糖体合成蛋白有抑制作用，想通过荧光素酶的表达量来检测这种抑制效果，文章中的同源蛋白是用这个试剂盒的，最后用GloMaxTM 96 Microplate Luminometer检测，但是实验室没有这个仪器，网上说M5酶标仪可以，但是自己又不知道具体的操作方法！想请教一下大家！
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Iknowsomeoneintheworldiswaitingforme,althoughI'venoideaofwhoheis.ButIfeelhappyeverydayforthis.
5楼2015-06-03 09:39:31
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-03 23:08:46
引用回帖:
5楼: Originally posted by fxj33102013 at 2015-06-03 09:39:31
买的是promega的rabbit reticulocyte lysates，我做的蛋白对核糖体合成蛋白有抑制作用，想通过荧光素酶的表达量来检测这种抑制效果，文章中的同源蛋白是用这个试剂盒的，最后用GloMaxTM 96 Microplate Luminometer ...

普洛麦格有说明书的，用PLB裂解你的样品，将你的萤火虫荧光素酶提取出来，然后加底物LARII，收集信号，再加终止液，再收集一次信号，两次的比值就是Luciferase的相对表达。用的仪器就是Lumimeter

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fxj33102013
天道酬勤
6楼2015-06-03 10:39:40
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fxj33102013

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-06-03 10:39:40
普洛麦格有说明书的，用PLB裂解你的样品，将你的萤火虫荧光素酶提取出来，然后加底物LARII，收集信号，再加终止液，再收集一次信号，两次的比值就是Luciferase的相对表达。用的仪器就是Lumimeter
...

谢谢您耐心的解答。但是我买的这个试剂盒本身就是裂解液，是一种无细胞表达体系，可以直接用于检测荧光素酶的表达量。我现在就是对仪器不太了解，因为实验室没有这种仪器，M5是我唯一能借到使用的仪器。
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Iknowsomeoneintheworldiswaitingforme,althoughI'venoideaofwhoheis.ButIfeelhappyeverydayforthis.
7楼2015-06-03 11:02:58
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bryantchow

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
8楼2015-06-03 20:07:20
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