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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » 求助大神 双荧光素酶报告基因的一些疑问！谢谢
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王政123

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助大神 双荧光素酶报告基因的一些疑问！谢谢 已有1人参与

大家好，我想问一下大家双荧光素酶报告基因是不是只能检测哺乳动物的转录因子与顺式作用元件的相互作用 ，不可以检测非哺乳动物比如鸡的转录因子与顺式作用元件的相互作用，如果不可以有什么办法验证体内他两者之间的相互作用，我们已经在RNA和蛋白水平验证了一些转录因子和下游基因有关联只是为了确定下游基因5‘端的BINDING SITE
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1楼 2015-04-15 18:31:07
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
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王政123: 金币+1 2015-04-15 22:09:58
应该不是，我们还用这个系统做植物的

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天道酬勤
2楼2015-04-15 18:55:12
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王政123

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-04-15 18:55:12
应该不是，我们还用这个系统做植物的

你们确定是用双荧光素酶报告做植物的转录因子和顺势元件之间的相互作用吗 比如PGL3这个载体不是用于研究对哺乳动物基因表达的因子吗，你们做的那个最后出了结果了么谢谢
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3楼2015-04-15 22:09:38
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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3楼: Originally posted by 王政123 at 2015-04-15 22:09:38
你们确定是用双荧光素酶报告做植物的转录因子和顺势元件之间的相互作用吗 比如PGL3这个载体不是用于研究对哺乳动物基因表达的因子吗，你们做的那个最后出了结果了么谢谢...

对呀，我做拟南芥的转录因子的，你们那个载体我不知道，我们用的p190:luc载体，我只知道用这个最后测出来的数据波动很大，不过你不是用生化做出来了吗？做的chip还是EMSA啊？这个瞬时表达分析也就是你的一个相互验证实验吧

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天道酬勤
4楼2015-04-15 22:14:07
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王政123

新虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-04-15 22:14:07
对呀，我做拟南芥的转录因子的，你们那个载体我不知道，我们用的p190:luc载体，我只知道用这个最后测出来的数据波动很大，不过你不是用生化做出来了吗？做的chip还是EMSA啊？这个瞬时表达分析也就是你的一个相互验 ...

我是希望通过这个去确定我目标得转路因子得binding
site所处区域然后通过突变查看她确定位置，你若说的波动大是什么意思，是实验组对照租得差异大还是重复性差啊………………

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2015-04-15 22:53:37
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 王政123 at 2015-04-15 22:53:37
我是希望通过这个去确定我目标得转路因子得binding
site所处区域然后通过突变查看她确定位置，你若说的波动大是什么意思，是实验组对照租得差异大还是重复性差啊………………
...

重复性差，每次结果差别很大

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天道酬勤
6楼2015-04-15 23:06:55
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王政123

新虫 (初入文坛)
我去，好吧但是肯定是能检测非哺乳系统得转路因子与bind互做是吧，太感谢了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2015-04-15 23:10:02
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