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sola0509

新虫 (初入文坛)

[求助] 浓度小的时候HPLC不出峰,怎么解决 已有2人参与

用HPLC做五氯苯酚的标准曲线的时候,2 mg/L和1 mg/L的五氯苯酚没有出峰,10 mg/L和5 mg/L的五氯苯酚有出峰。5 mg/L五氯苯酚的峰很小,目测的话很难相信是10 mg/L五氯苯酚出峰的一半大小,但是从出峰的面积的大小来看,差不多是10 mg/L五氯苯酚出峰面积的一半。
HPLC条件:Mightysil RP18 GP 150×4.6(5 μm)柱;  柱温40℃; 流速 1 mL/min; 流动相 甲醇:水=7:3 ;波长305 nm; 五氯苯酚的溶剂是甲醇

请问怎么样才能让2 mg/L和1 mg/L的五氯苯酚也出峰呢? 谢谢!!
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
sola0509: 金币+3, 有帮助 2015-06-06 14:06:00
引用回帖:
3楼: Originally posted by sola0509 at 2015-06-01 22:45:00
测过了,用10 mg/L五氯苯酚测得的最大吸收峰在304 nm那里,之后又测了10 mg/L苯酚的最大吸收峰是270 nm,把这两种溶液1:1混合后,在280 nm测了一下,只有一个峰(苯酚)...

你的峰是不是很宽呀?试试在流动相里加0.1%的甲酸

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-06-02 21:13:26
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你测过最大吸收峰在哪里吗?找几个化合物吸收都强的波长检测。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-06-02 14:33:18
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sola0509

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by superyeast at 2015-06-02 14:33:18
你测过最大吸收峰在哪里吗?找几个化合物吸收都强的波长检测。

测过了,用10 mg/L五氯苯酚测得的最大吸收峰在304 nm那里,之后又测了10 mg/L苯酚的最大吸收峰是270 nm,把这两种溶液1:1混合后,在280 nm测了一下,只有一个峰(苯酚)
3楼2015-06-02 14:45:00
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

可以试试用梯度洗脱,举个例子,你可以根据实际情况调整,0-2 min,30%甲醇,2-10 min,30%-70%甲醇。1 mg/L的确挺低的,紫外不一定能测的到。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
4楼2015-06-02 14:45:31
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