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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 浓度小的时候HPLC不出峰，怎么解决
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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sola0509

新虫 (初入文坛)

[求助] 浓度小的时候HPLC不出峰，怎么解决 已有2人参与

用HPLC做五氯苯酚的标准曲线的时候，2 mg/L和1 mg/L的五氯苯酚没有出峰，10 mg/L和5 mg/L的五氯苯酚有出峰。5 mg/L五氯苯酚的峰很小，目测的话很难相信是10 mg/L五氯苯酚出峰的一半大小，但是从出峰的面积的大小来看，差不多是10 mg/L五氯苯酚出峰面积的一半。
HPLC条件：Mightysil RP18 GP 150×4.6（5 μm）柱；  柱温40℃； 流速 1 mL/min; 流动相 甲醇：水=7:3 ；波长305 nm; 五氯苯酚的溶剂是甲醇

请问怎么样才能让2 mg/L和1 mg/L的五氯苯酚也出峰呢？ 谢谢！！
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1楼 2015-06-02 14:18:23
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你测过最大吸收峰在哪里吗？找几个化合物吸收都强的波长检测。

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2楼2015-06-02 14:33:18
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sola0509

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by superyeast at 2015-06-02 14:33:18
你测过最大吸收峰在哪里吗？找几个化合物吸收都强的波长检测。

测过了，用10 mg/L五氯苯酚测得的最大吸收峰在304 nm那里，之后又测了10 mg/L苯酚的最大吸收峰是270 nm，把这两种溶液1:1混合后，在280 nm测了一下，只有一个峰（苯酚）
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3楼2015-06-02 14:45:00
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
可以试试用梯度洗脱，举个例子，你可以根据实际情况调整，0-2 min，30%甲醇，2-10 min，30%-70%甲醇。1 mg/L的确挺低的，紫外不一定能测的到。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
4楼2015-06-02 14:45:31
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
sola0509: 金币+3, ★有帮助 2015-06-06 14:06:00
引用回帖:
3楼: Originally posted by sola0509 at 2015-06-01 22:45:00
测过了，用10 mg/L五氯苯酚测得的最大吸收峰在304 nm那里，之后又测了10 mg/L苯酚的最大吸收峰是270 nm，把这两种溶液1:1混合后，在280 nm测了一下，只有一个峰（苯酚）...

你的峰是不是很宽呀？试试在流动相里加0.1%的甲酸

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5楼2015-06-02 21:13:26
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mao877516786

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sola0509: 金币+2, ★有帮助 2015-06-06 14:06:21
找一下最大吸收波长，然后改用快梯度洗脱，这样效果可能会好一些。
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6楼2015-06-03 08:11:28
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