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HPLC和LC-MS相同物质出峰顺序不同？都是C18柱，求解已有3人参与
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不知道大家遇到过做HPLC和做LC-MS时，相同的流动相比例，但是物质出峰顺序不一样的情况？ HPLC条件：30min梯度，5%Methanol：95%Water——95%Methanol：5%Water；Waters C18 250mm*4.6mm，5μm柱 LC-MS条件：8min梯度，5%Methanol：95%Water——95%Methanol：5%Water；Waters XBridge BEH C18 XP column(75 mm × 2.1 mm, 2.5μm) LC-MS中水加0.1%甲酸，不过不加时B还是在A前~  M5_杂质_HPLC.png  M5_杂质_lcms.png |
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2楼2014-04-13 00:05:07
kf1009
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3楼2014-04-14 09:20:20
【答案】应助回帖
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正常现象。 Waters色谱柱有很多细分种类，比如较早的Sunfire、Symmetry、SymmetryShield、Xbridge、XTerra等等。尽管这些都是C18柱，但此C18和彼C18有一些细微的区别。这主要是因为Waters在对色谱柱的硅羟基进行屏蔽、增强取代基耐受性方面的一些枝节、改性、包裹等技术带来的。 比如，Symmetry和SymmetryShield，在疏水保留的特性上基本一致，但因为其C18链与硅胶的结合方式不同，在遇到一些极性物质时，其分离的选择性就有了差异。时常出现其他所有峰都一致，而个别峰出峰顺序变化较大的情况。 Waters在遇到这个问题时，把这作为一种优势，认为这样可以给客户提供更加丰富的选择性区分。同时也常把这两种色谱柱成对推荐。 LZ可以向Waters销售确认现有色谱柱的具体型号，咨询其相对型号的色谱柱进行对比试验。 |
4楼2014-04-14 13:53:16
5楼2014-04-18 16:39:52
iamyuancheng
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