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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC和LC-MS相同物质出峰顺序不同？都是C18柱，求解
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苜蔷

铁虫 (小有名气)

[求助] HPLC和LC-MS相同物质出峰顺序不同？都是C18柱，求解 已有3人参与

不知道大家遇到过做HPLC和做LC-MS时，相同的流动相比例，但是物质出峰顺序不一样的情况？
HPLC条件：30min梯度，5%Methanol：95%Water——95%Methanol：5%Water；Waters C18 250mm*4.6mm，5μm柱
LC-MS条件：8min梯度，5%Methanol：95%Water——95%Methanol：5%Water；Waters XBridge BEH C18 XP column(75 mm × 2.1 mm, 2.5μm)
LC-MS中水加0.1%甲酸，不过不加时B还是在A前~

HPLC和LC-MS相同物质出峰顺序不同？都是C18柱，求解
M5_杂质_HPLC.png


HPLC和LC-MS相同物质出峰顺序不同？都是C18柱，求解-1
M5_杂质_lcms.png
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1楼 2014-04-12 17:45:13
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maxmahao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
苜蔷: 金币+4, ★★★很有帮助, 嗯嗯，谢谢，之前还不晓得有这样的转换软件 2014-04-13 10:12:05
还真是有可能，毕竟柱子变了嘛
你试试UPLC软件里面有个HPLC分析方法转化为UPLC方法的工具
来试试看，转化后的和你一不一样
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2楼2014-04-13 00:05:07
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
苜蔷: 金币+2, ★★★很有帮助, 嗯，B中有个重氮结构连着吡唑和二甲基氨基 2014-04-18 16:34:31
杂质B应该带氨基显碱性，酸性条件下保留性降低，正离子模式质谱信号较强。
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快乐不需要走遍天涯去寻找，只需播一粒种子在脚下。
3楼2014-04-14 09:20:20
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axearmy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
苜蔷: 金币+4, ★★★很有帮助, 谢谢，学习了 2014-04-18 16:38:53
正常现象。
Waters色谱柱有很多细分种类，比如较早的Sunfire、Symmetry、SymmetryShield、Xbridge、XTerra等等。尽管这些都是C18柱，但此C18和彼C18有一些细微的区别。这主要是因为Waters在对色谱柱的硅羟基进行屏蔽、增强取代基耐受性方面的一些枝节、改性、包裹等技术带来的。
比如，Symmetry和SymmetryShield，在疏水保留的特性上基本一致，但因为其C18链与硅胶的结合方式不同，在遇到一些极性物质时，其分离的选择性就有了差异。时常出现其他所有峰都一致，而个别峰出峰顺序变化较大的情况。
Waters在遇到这个问题时，把这作为一种优势，认为这样可以给客户提供更加丰富的选择性区分。同时也常把这两种色谱柱成对推荐。

LZ可以向Waters销售确认现有色谱柱的具体型号，咨询其相对型号的色谱柱进行对比试验。
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4楼2014-04-14 13:53:16
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苜蔷

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by kf1009 at 2014-04-14 09:20:20
杂质B应该带氨基显碱性，酸性条件下保留性降低，正离子模式质谱信号较强。

后来又进样了，用纯水和用加了千分之一的甲酸，确实出峰顺序不同
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5楼2014-04-18 16:39:52
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iamyuancheng

铁杆木虫 (著名写手)
流动相pH变了，可能你在HPLC上改成同样pH会得到相同结果
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请保持微笑！
6楼2014-04-18 17:01:21
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苜蔷

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by iamyuancheng at 2014-04-18 17:01:21
流动相pH变了，可能你在HPLC上改成同样pH会得到相同结果

恩，就是，看来加的甲酸还是差异很大
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7楼2014-04-22 14:44:25
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