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日光海铜虫 (小有名气)
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[求助]
Red敲除！求含sacB质粒和卡那抗性质粒已有2人参与
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如题，最近小弟做Red敲除，用上海大学一教授赠与的pEX18Ap扩sacB-bla打靶片段却怎么也P不出来，已经做了两个月了还是木有结果 。结果用质粒转化DH5α后在15%蔗糖LB上都长出来了 。。。怀疑质粒可能送错了。所以想自己用overlap PCR将sacB和卡那霉素抗性片段连接到一起。但缺少sacB质粒。求含sacB的pEX18Tc、pEX18Gm、pEX18Ap或pCVD442中的任何一种，若有卡那抗性的质粒一并求助吧。目前实验室自己只有pRKaraRed和一些pMD18T等常规质粒，如需要可交换互助。 |
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