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melindag

木虫 (初入文坛)

[求助] 氯霉素和卡那霉素对pSC101复制子所产生的质粒拷贝数有什么影响? 已有1人参与

请问各位大神,不同抗性对pSC101复制子所产生的质粒拷贝数会哪些影响?氨苄的对该复制子影响大么?
氯霉素会增殖低拷贝质粒,那么卡那霉素对该低拷贝数的复制子又会有哪些影响呢?
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biostar2009

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【答案】应助回帖

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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-22 16:44:33
第一次听说这个pSC101,一查,原来是老祖宗们第一次用来克隆基因使用的载体!敬佩!
看年代,这应该是一个低拷贝的质粒了,那会估计还没有发现质粒拷贝数的控制机制。

但是楼主,你的概念是混淆的。
氯霉素为什么能提高低拷贝质粒的含量呢?
并不是氯霉素对这个质粒的复制子有什么特殊功效,正如氯霉素是到了摇菌后期加入一样,他的加入仅仅是发挥它的本分功能——抑制翻译,因为发现这些翻译被抑制的细菌,还能忠实的继续复制它们的质粒2-3轮,虽然氯霉素的作用也仅能如此了,但是对一个低拷贝质粒而言,能多一点就多一点吧。

所以如果你的问题是,为什么要加氯霉素而非其他的抗生素呢?
可能还可以讨论一下。
2楼2014-03-22 14:09:20
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melindag

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-22 14:09:20
第一次听说这个pSC101,一查,原来是老祖宗们第一次用来克隆基因使用的载体!敬佩!
看年代,这应该是一个低拷贝的质粒了,那会估计还没有发现质粒拷贝数的控制机制。

但是楼主,你的概念是混淆的。
氯霉素为什 ...

我现在准备自己构建质粒,在抗性的选择中,如果是一个低拷贝质粒的话,选择卡那霉素抗性又有什么作用?以你上面的解释,相比较之下,氯霉素的抗性更加?
3楼2014-03-24 10:01:45
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by melindag at 2014-03-24 10:01:45
我现在准备自己构建质粒,在抗性的选择中,如果是一个低拷贝质粒的话,选择卡那霉素抗性又有什么作用?以你上面的解释,相比较之下,氯霉素的抗性更加?...

你仍旧没有理解我的意思,
抗性基因跟氯霉素提高质粒无关
或者说,对于有氯霉素抗性的低拷贝质粒,氯霉素完全没有提高质粒拷贝的作用。
你自己想构建质粒,勇气可嘉,但是你还得多研究一下质粒各个元件的作用。
更详细的,分子克隆第三版第一章,有很详细的解释。
4楼2014-03-24 10:13:25
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melindag

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-24 10:13:25
你仍旧没有理解我的意思,
抗性基因跟氯霉素提高质粒无关
或者说,对于有氯霉素抗性的低拷贝质粒,氯霉素完全没有提高质粒拷贝的作用。
你自己想构建质粒,勇气可嘉,但是你还得多研究一下质粒各个元件的作用。 ...

好,谢谢,我再好好看看。
5楼2014-03-24 10:25:14
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