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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 氯霉素和卡那霉素对pSC101复制子所产生的质粒拷贝数有什么影响？
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melindag

木虫 (初入文坛)

[求助] 氯霉素和卡那霉素对pSC101复制子所产生的质粒拷贝数有什么影响？ 已有1人参与

请问各位大神，不同抗性对pSC101复制子所产生的质粒拷贝数会哪些影响？氨苄的对该复制子影响大么？
氯霉素会增殖低拷贝质粒，那么卡那霉素对该低拷贝数的复制子又会有哪些影响呢？
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1楼 2014-03-22 13:34:41
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-22 16:44:33
第一次听说这个pSC101，一查，原来是老祖宗们第一次用来克隆基因使用的载体！敬佩！
看年代，这应该是一个低拷贝的质粒了，那会估计还没有发现质粒拷贝数的控制机制。

但是楼主，你的概念是混淆的。
氯霉素为什么能提高低拷贝质粒的含量呢？
并不是氯霉素对这个质粒的复制子有什么特殊功效，正如氯霉素是到了摇菌后期加入一样，他的加入仅仅是发挥它的本分功能——抑制翻译，因为发现这些翻译被抑制的细菌，还能忠实的继续复制它们的质粒2-3轮，虽然氯霉素的作用也仅能如此了，但是对一个低拷贝质粒而言，能多一点就多一点吧。

所以如果你的问题是，为什么要加氯霉素而非其他的抗生素呢？
可能还可以讨论一下。
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2楼2014-03-22 14:09:20
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melindag

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-22 14:09:20
第一次听说这个pSC101，一查，原来是老祖宗们第一次用来克隆基因使用的载体！敬佩！
看年代，这应该是一个低拷贝的质粒了，那会估计还没有发现质粒拷贝数的控制机制。

但是楼主，你的概念是混淆的。
氯霉素为什 ...

我现在准备自己构建质粒，在抗性的选择中，如果是一个低拷贝质粒的话，选择卡那霉素抗性又有什么作用？以你上面的解释，相比较之下，氯霉素的抗性更加？
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3楼2014-03-24 10:01:45
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by melindag at 2014-03-24 10:01:45
我现在准备自己构建质粒，在抗性的选择中，如果是一个低拷贝质粒的话，选择卡那霉素抗性又有什么作用？以你上面的解释，相比较之下，氯霉素的抗性更加？...

你仍旧没有理解我的意思，
抗性基因跟氯霉素提高质粒无关
或者说，对于有氯霉素抗性的低拷贝质粒，氯霉素完全没有提高质粒拷贝的作用。
你自己想构建质粒，勇气可嘉，但是你还得多研究一下质粒各个元件的作用。
更详细的，分子克隆第三版第一章，有很详细的解释。
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4楼2014-03-24 10:13:25
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melindag

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-24 10:13:25
你仍旧没有理解我的意思，
抗性基因跟氯霉素提高质粒无关
或者说，对于有氯霉素抗性的低拷贝质粒，氯霉素完全没有提高质粒拷贝的作用。
你自己想构建质粒，勇气可嘉，但是你还得多研究一下质粒各个元件的作用。 ...

好，谢谢，我再好好看看。
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5楼2014-03-24 10:25:14
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