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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » Red敲除！求含sacB质粒和卡那抗性质粒
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日光海

铜虫 (小有名气)

[求助] Red敲除！求含sacB质粒和卡那抗性质粒 已有2人参与

如题，最近小弟做Red敲除，用上海大学一教授赠与的pEX18Ap扩sacB-bla打靶片段却怎么也P不出来，已经做了两个月了还是木有结果。结果用质粒转化DH5α后在15%蔗糖LB上都长出来了。。。怀疑质粒可能送错了。
所以想自己用overlap PCR将sacB和卡那霉素抗性片段连接到一起。但缺少sacB质粒。求含sacB的pEX18Tc、pEX18Gm、pEX18Ap或pCVD442中的任何一种，若有卡那抗性的质粒一并求助吧。目前实验室自己只有pRKaraRed和一些pMD18T等常规质粒，如需要可交换互助。
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周老湿
1楼 2015-05-26 15:35:11
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ring02

新虫 (初入文坛)
你好，最近准备用Red做敲除，不知道能不能馈赠一些pRKaraRed质粒，我购买也行。谢谢！
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10楼2015-12-16 12:20:58
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