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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 有关酵母转化表达
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liuyu-liuyu

木虫 (小有名气)

[求助] 有关酵母转化表达 已有2人参与

酵母转化，目的基因是个酶，表达后有明显酶活，但是做基因组PCR无目的带，哪位大神能帮忙分析一下可能的原因？酵母本身是不含我的这个酶的，不会产生酶活。
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1楼 2015-04-24 09:03:27
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浴火月

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-04-25 13:01:50
可能是pcr的问题，题主模板是提取酵母基因组做的吗，引物以及程序都没有问题吧
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2楼2015-04-24 10:40:40
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liuyu-liuyu

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 浴火月 at 2015-04-24 10:40:40
可能是pcr的问题，题主模板是提取酵母基因组做的吗，引物以及程序都没有问题吧

做了阳性对照，是含有我目的基因的质粒，阳性对照有目的产物
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3楼2015-04-24 10:54:04
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nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-04-25 13:01:55
liuyu-liuyu: 金币+5, ★有帮助 2015-04-28 08:26:55
本帖内容被屏蔽
4楼2015-04-24 11:16:23
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liuyu-liuyu

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by nemo88 at 2015-04-24 11:16:23
同二楼一样，你并没有回答人家二楼的问题
是否是用基因组做的  还是裂解菌体做的PCR

提取的基因组
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5楼2015-04-25 09:41:44
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nemo88

禁虫 (小有名气)
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6楼2015-04-27 16:14:29
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liuyu-liuyu

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by nemo88 at 2015-04-27 16:14:29
呵呵  不太清楚基因组做的效果 没提过基因组
以前是用0.02%SDS煮沸裂解菌体直接PCR  挺好用的  效果挺好的...

哦！
7楼2015-04-28 08:26:27
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