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关于蛋白银染的问题 已有2人参与
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| 我跑蛋白组分SDS电泳，可能是组分含量太少，第一次用考染基本没啥条带，考虑用银染，固定液是10%的乙酸和50%的乙醇，固定了一夜，结果缩胶很厉害，是固定液浓度过高的原因吗？那过夜固定的配比是什么？还有，缩胶用蒸馏水泡着的话能不能还原了？？谢谢！ |
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建议你还是百度一下银染的protocol吧 银染是很灵敏的 对于时间的掌握更是非常之重要 没听说过做银染固定一夜的 一般是固定半小时 这里给你一个我的参考步骤 Solutions for Silver Stain 1. 固定剂：双蒸水：乙醇：乙酸 250：200:50 固定30min 2. 敏化液：无水乙酸钠5.1g 硫代硫酸钠0.15g 去离子水52.5ml 无水乙醇22.5ml 敏化35min后水洗三遍每次5min 3. 银染液：0.1875g硝酸银 去离子水75ml 银染20min后水洗两遍每次3min 4. 显色液：1.875g无水碳酸钠 去离子水75ml 临用前加入30ul甲醛 显色至条带清晰后立即终止 5．终止液：1gEDTA溶于75ml去离子水 终止液孵育10min后将终止液换成水即可保存一周左右的时间 |
2楼2015-04-24 10:33:48
3楼2015-04-24 21:34:55