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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 枯草芽孢杆菌生长曲线的测定？细节问题
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天羽耀星梦

新虫 (小有名气)

[交流] 枯草芽孢杆菌生长曲线的测定？细节问题

枯草芽孢杆菌生长曲线的测定，菌量测定用什么方法比较好？有的人是在显微镜上用血求计数板数，有的用稀释涂板，有的用分光光度计测OD值，有的直接绘制OD值曲线，有的换算成菌量绘制。哪个准确些？


如果用紫外分光光度计测的话，在哪那个波长测OD值，如何确定？OD值与菌量关系如何测定？后面菌量大的时候如何稀释？用什么稀释？稀释多少倍合适？


实验过程中，取样的时间用不用刨除？用不用在紫外下灭菌再取样？取样一般去多少合适？前面取样后，发酵液逐渐减少，对后面的发酵有没有影响？用不用做重复？重复的话是都测还是在某一时间只测其中一个？

作为种子液的话，接种是在什么时候比较好？对数期中间还是...
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1楼 2015-04-19 11:08:10
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zht930528

木虫 (正式写手)

麻辣王子
等大神回复学习

[ 发自小木虫客户端 ]
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麻辣王子不爱做实验
2楼2015-04-19 17:19:26
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萍聚

金虫 (正式写手)
等学习

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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佛说五百年的回眸换来今生的擦肩而过，我已经整整等了一千年！
3楼2015-04-19 17:39:44
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ccdbaobao

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
天羽耀星梦: 金币+1 2015-04-21 00:24:53
我觉得不论用哪种方法都是测定一个菌量的范围，比如说10八次方。至于哪种方法比较好我也不敢太确定。
我一直在用分光光度法来确定菌体的生长曲线，不需要紫外，用可见光OD600波长就行。一般菌体生长到对数中后期便可以达到10八次方数量级。可以每隔2小时取样测定吸光度，连续取样12到24小时，有的菌体生长很缓慢，需要测定的时间会长一些，甚至会达到24小时以上。。。
至于取样的时间，个人觉得不需要刨除，每次取样速度要快，最好在超净台中操作，取完后可以先将菌液放入摇床再去测量。
每次取样后发酵液肯定会减少，甚至到最后发酵液都被用掉，理论上讲肯定会对结果有影响，但是个人觉得影响不会很大，应该不会影响到生长曲线的绘制，毕竟只是大致确定一个生长时期，不需要确定具体的菌量。
种子液接种时期要看你试验目的，我一般是在对数生长末期进行接种。只要在对数期应该就好。
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4楼2015-04-20 10:25:09
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courageeee

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我实验室做生长曲线一般是测OD的，OD600测的，或者稀释涂板子，10的-6次方。做生长曲线一般隔4小时，这要根据你的目的。
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5楼2015-04-21 10:45:59
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李素贞

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by ccdbaobao at 2015-04-20 10:25:09
我觉得不论用哪种方法都是测定一个菌量的范围，比如说10八次方。至于哪种方法比较好我也不敢太确定。
我一直在用分光光度法来确定菌体的生长曲线，不需要紫外，用可见光OD600波长就行。一般菌体生长到对数中后期便 ...

那怎么根据OD值来确定生长曲线呢？

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6楼2017-09-04 08:22:20
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