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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 细菌生长曲线不会做
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scqwdq123

新虫 (小有名气)

[求助] 细菌生长曲线不会做 已有10人参与

大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长曲线真的不会做！！周末只睡了三个多小时做细菌曲线，我测得OD600 超过0.8我就用培养基1：1稀释了，结果做的图（培养时间和OD600）在从稀释那一刻开始突然下滑，并没有你们所说的线性！这个问题我之前想到了，但是我想知道大家说的稀释是整个过程按一定的比例稀释还是随便稀释，稀释有什么根据吗？这个曲线到底怎么做啊？做不出来了，烦，，，身边没有做微生物的，没法交流，就在这求救了呜呜呜
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1楼 2014-05-19 10:21:21
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scqwdq123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 20093651 at 2014-05-20 19:18:23
楼主，稀释了之后你一定要晓得你的稀释倍数啊，然后才能还原，建议看看沈萍主编的那本微生物实验手册

我正在看那本书，生长曲线也是按这本书上做得，难道我倍数取得不对，，，
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9楼2014-05-20 22:03:15
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scqwdq123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sparrow2002 at 2014-05-20 16:45:12
大肠杆菌一般稀释10倍测OD就行，每1小时取一次样测量。跟接种量也有关系，接种量大了，长的就快。

好的，我试试这个方法
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13楼2014-05-20 22:19:44
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亡佚

至尊木虫 (正式写手)

玩细胞的小逗逼~
引用回帖:
8楼: Originally posted by scqwdq123 at 2014-05-20 22:01:34
我乘上了稀释倍数的，我用的营养肉汤培养基，做出的图很不好，明天再试一次，你们是每次稀释都是稀释同一个倍数还是随便稀释？...

稀释倍数应该是逐渐增加的啊~
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凡所有相，皆為虛妄。
17楼2014-05-21 12:32:07
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DoRbIr

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

其实，稀释倍数是试出来的，楼主只要记住两条就可以了：1、分光光度计不能超1.0，最好是0.2~0.8之间，这段是线性最好的；2、稀释完涂平板计数，菌落一定要分开，不能连成菌苔，所以要控制稀释倍数和培养时间。这条是原则，其他就是随机应变了，反正能算出来的。顺便说一句，我喜欢十倍十倍的稀释，这样便于操作和计算。
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19楼2014-05-23 06:26:19
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普通回帖

bamyl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+1, 鼓励应助 2014-05-20 20:59:13
稀释需要按照一定比例，我一般稀释5-10倍，具体看你的菌长到最后的浓度，按照比例稀释，得出的OD值做计数，做曲线，这样如果有其他数值，从曲线找出对应的菌数，乘以稀释倍数就可以了。
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2楼2014-05-20 10:07:51
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yunyi712100

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+2, 鼓励新虫发帖应助 2014-05-20 20:59:02
scqwdq123: 金币+1 2014-05-20 22:19:01
一般分光光度计都有一个线性范围。你可以在LB上过夜培养大肠杆菌，然后稀释不同倍数测OD值，你会发现测得OD值乘以稀释倍数只在某一范围内是一直的。这是仪器读取问题。另外你要保证菌的生长一致性。
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3楼2014-05-20 16:37:21
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sparrow2002

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+2, 鼓励新虫发帖应助 2014-05-20 20:59:19
大肠杆菌一般稀释10倍测OD就行，每1小时取一次样测量。跟接种量也有关系，接种量大了，长的就快。
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4楼2014-05-20 16:45:12
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亡佚

至尊木虫 (正式写手)

玩细胞的小逗逼~

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+1 2014-05-20 20:59:26
scqwdq123: 金币+1 2014-05-20 22:01:40
从稀释那一刻开始突然下滑？稀释之后菌浓下降了啊，楼主乘上稀释倍数没啊···还有楼主用什么培养的啊，LB培养20h应该就可以绘出曲线了啊。
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凡所有相，皆為虛妄。
5楼2014-05-20 19:12:59
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20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+1 2014-05-20 20:59:37
楼主，稀释了之后你一定要晓得你的稀释倍数啊，然后才能还原，建议看看沈萍主编的那本微生物实验手册
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但行好事，莫问前程
6楼2014-05-20 19:18:23
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树2979

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+1, 鼓励应助 2014-05-20 20:59:58
scqwdq123: 金币+1 2014-05-20 22:14:40
同学不是高密度培养的吧？那就从头开始统一稀释个五倍或者十倍！全部一样的比例，很好做的

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7楼2014-05-20 20:16:40
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scqwdq123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 亡佚 at 2014-05-20 19:12:59
从稀释那一刻开始突然下滑？稀释之后菌浓下降了啊，楼主乘上稀释倍数没啊···还有楼主用什么培养的啊，LB培养20h应该就可以绘出曲线了啊。

我乘上了稀释倍数的，我用的营养肉汤培养基，做出的图很不好，明天再试一次，你们是每次稀释都是稀释同一个倍数还是随便稀释？
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8楼2014-05-20 22:01:34
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scqwdq123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 树2979 at 2014-05-20 20:16:40
同学不是高密度培养的吧？那就从头开始统一稀释个五倍或者十倍！全部一样的比例，很好做的

从头开始？意思是刚开始就稀释吗？那刚开始会不会测得OD值为0啊？
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10楼2014-05-20 22:08:51
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