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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 细菌的标准曲线的做法
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YJD落叶梧桐

新虫 (小有名气)

[求助] 细菌的标准曲线的做法

我是新手，想问问有哪位高人做过细菌的标准曲线？
还有每个菌做的方法不一样吗？
希望有人能给以指导，谢谢了
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1楼 2011-08-21 22:52:56
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

苏跃稳

新虫 (初入文坛)
测曲线还要熬夜？
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10楼2015-03-22 13:32:00
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普通回帖

D_sheldon

银虫 (小有名气)
什么叫做细菌的标准曲线？能准确，具体点吗，是说它的OD值和浓度的曲线还是什么。你这个说法我好像没听过。。。
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如果要让我活让我骄傲的活
2楼2011-08-21 23:21:08
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带刀猎人

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

YJD落叶梧桐(金币+1): 2011-08-23 08:13:07
编号，接种，培养至适当时间取出一支4度冻存，全部培养完成后测OD600，绘制曲线
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3楼2011-08-22 11:41:54
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YJD落叶梧桐

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 带刀猎人 at 2011-08-22 11:41:54:
编号，接种，培养至适当时间取出一支4度冻存，全部培养完成后测OD600，绘制曲线

你能说得具体点吗？你是怎么测的细菌数呢，是平皿还是细胞计数板呢又或者别的什么方法啊，还有测OD的时间点都是多少啊，我测的是鲍曼不动杆菌，谢谢了！
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4楼2011-08-22 16:33:12
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YJD落叶梧桐

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by D_sheldon at 2011-08-21 23:21:08:
什么叫做细菌的标准曲线？能准确，具体点吗，是说它的OD值和浓度的曲线还是什么。你这个说法我好像没听过。。。

标准曲线就是以OD值和细菌浓度为横坐标和纵坐标做的曲线，用来计算细菌的浓度的
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5楼2011-08-22 16:38:27
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ayu19860524

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

YJD落叶梧桐(金币+1): 谢谢你的帮忙，可是我还是不知道怎么样对菌液进行计数 2011-08-24 09:27:24
如果采用OD值法的话，你可以培养稀释一系列的不同OD值的菌液，然后对各个菌液进行计数，这样就可以得到标曲了。
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6楼2011-08-23 23:39:12
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YJD落叶梧桐

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ayu19860524 at 2011-08-23 23:39:12:
如果采用OD值法的话，你可以培养稀释一系列的不同OD值的菌液，然后对各个菌液进行计数，这样就可以得到标曲了。

我准备用平板计数，但不知要怎么把菌液涂到平板，有人建议我用L棒或者双层平板，你觉得那个更好些啊？
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7楼2011-08-24 07:52:19
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带刀猎人

新虫 (小有名气)
我测定都是间隔两小时，当然如果要测定精确的各生长期折点可以在把时间精密一下，（比如1h测一次），但是这样工作量很大，平板菌落计数法，涂布器涂布比倾注平板法要好。
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8楼2011-08-24 10:46:42
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michaelcyq

铁杆木虫 (小有名气)
标准曲线？估计lz说的生长曲线吧....
在培养体系中培养，隔段时间取出来测定细菌浓度就好了
测定细菌浓度很多方法，最简单的就是OD法 (optical density)，最麻烦的应该就是稀释平板计数。
除了上述两种方法，细胞大的话可以尝试下血球计数板直接显微镜镜检计数，小的话可以用荧光染色剂(syto, DAPI等)染色后显微镜计数。
还有别的一些间接方法，如磷脂法等等，都比较麻烦。

lz可以参用两种不同的方法来做，叫所谓的double check，呵呵
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9楼2011-08-24 10:55:00
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