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金虫 (小有名气)

科学勇士

[求助] CTAB法提取植物DNA有些疑问想要请教你们,恳请各位老师指点!

各们老师,你们好!我对于CTAB法提取植物DNA有些疑问想要请教你们,恳请各位老师指点!问题如下:
1. CTAB抽取液:(1)CTAB抽提液:<1>2%(w/v)CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),
<2>100mmol/L Tris·CI,PH8.O:在8mlH20中溶解1.219Tris碱,加水至
100ml,加入O.1mol/L HCl58.4m1(91.38mlH20加8.62ml浓HCI),
<3>20mmol/LEDTA,PH8.0,<4>1.4m01/LNaCl。这个抽提液是该如何提取呢?是将这些1.2.3.4种溶液分别配好然后再混合在一起还是一开始就加入一定量最终 定容呢?如果是最终定容,那每种成分的加入量又该如何计算呢?
2.CrAB沉淀液:<1>1%(w/v)CTAB,<2>50mmolfLTris·C1,PH8.O:取(2)
中100mmol/L Tris·Cl 50ml,加入50ml水,调节PH8.0,<3>10mmol/L
EDTA,PH8.这个沉淀液的配制又是如何配呢?
3.在1问中的20mmol/LEDTA,PH8.0,这个是单纯的EDTA还是Na2EDTA呢?调PH是用氢氧化钠调吗?
4.用等体积的25:24:1酚/氯仿/异戊醇抽提匀浆液,颠倒使之充分混合,分
装到1.5ml的离心管中。这个等体积的25:24:1酚/氯仿/异戊醇抽提匀浆液是直接量取25ml.24ml.1ml来配吗?这里的酚是什么酚?
各位前辈,由于我刚开始接触这方面的,所以有很多不懂的地方,所以还望各位老师多多指点和多多包涵!当然,也希望各位能讲得细一点,谢谢你们了!我殷切的期望老师前辈们的指点和回复!最后祝您们身体健康,万事如意!

CTAB法提取植物DNA有些疑问想要请教你们,恳请各位老师指点!
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