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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 制备型液相色谱如何确定收集时间
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杨柳依净水

铜虫 (小有名气)

[求助] 制备型液相色谱如何确定收集时间 已有4人参与

现有一混合物，想确定里面两种物质的含量，但无纯品，不知道出峰时间。导师说用制备型液相色谱制备纯品，但不知道收集时间，该怎么确定？谢谢
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1楼 2015-03-30 15:54:05
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
现在HPLC上摸索，确定出峰时间，再转移方法至PreHPLC上。
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归零
2楼2015-03-30 16:24:16
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xuchao7447

木虫 (著名写手)

超

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先用少量的混合物摸索流动相条件，有现成的更好！保证这两种物质保留时间完全错开，收集的时候把一整个峰收进去就可以了，取一点样做个质谱基本就OK啦！
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生活就是如此
3楼2015-03-30 16:29:03
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杨柳依净水

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xuchao7447 at 2015-03-30 16:29:03
先用少量的混合物摸索流动相条件，有现成的更好！保证这两种物质保留时间完全错开，收集的时候把一整个峰收进去就可以了，取一点样做个质谱基本就OK啦！

收集时能确保只收集一个峰，不会有其他东西？因为还没接触过仪器，所以不清楚
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4楼2015-03-31 09:08:42
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peter002

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by 杨柳依净水 at 2015-03-31 09:08:42
收集时能确保只收集一个峰，不会有其他东西？因为还没接触过仪器，所以不清楚...

收集的时间要摸索的，仪器不一样，延迟时间不同。
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5楼2015-03-31 11:28:41
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最好先走个LC-MS证明有要的东西，也看个大致比例和极性（出峰位置）。然后再上制备。

先用较稀的样品小体积进样摸条件。比方说真正制备时用200mg/mL的溶液每针打500uL，你可以从100mg/mL，50uL开始摸条件，目的是要的东西和杂质分开，峰形好。然后设定收集要的组分，逐渐加大进样量和浓度，并微调收集参数，兼顾产率和纯度。必要时牺牲产率顾纯度。

[ 发自小木虫客户端 ]
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6楼2015-03-31 14:33:02
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杨柳依净水

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by superyeast at 2015-03-31 14:33:02
最好先走个LC-MS证明有要的东西，也看个大致比例和极性（出峰位置）。然后再上制备。

先用较稀的样品小体积进样摸条件。比方说真正制备时用200mg/mL的溶液每针打500uL，你可以从100mg/mL，50uL开始摸条件，目的是 ...

恩，谢谢，回头试试
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7楼2015-03-31 15:26:46
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