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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 快速制备色谱上分离问题
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月下飞雪

金虫 (小有名气)

[求助] 快速制备色谱上分离问题

在用快速制备液相分离时，分得三个峰，分的很开，但是，第二个峰和第三个峰旋干发现几乎没东西，把第一个峰旋干，再次进制备，发现得到和初次的三个峰一样的峰（出峰时间一样），这是怎么回事，求指点呀，用的120克C18反相柱，水和甲醇为流动相
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1楼 2012-08-24 21:46:06
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Bryant_x

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢啦 2012-08-25 08:34:53
月下飞雪: 金币+5 2012-09-06 08:43:58
你用的是自动馏分接收器吗？还有你的上样量、流速是多大？你第一个峰和后两个峰的吸收值是多大？你可以先减小上样量试试
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2楼2012-08-25 01:40:36
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ask_cl2008

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+2, 鼓励新虫 2012-08-25 08:34:10
月下飞雪: 金币+20, ★有帮助 2012-09-06 08:43:43
1.将你所要分离的产品从HPLC按正常程序走一遍，直至没有其他峰出现，即可停止；
2.对比你要的产品出峰时间及位置；
3.进样时，流速调慢，也就相当于柱纯化，便于收集所要产品及杂质，为了更好地有效分离；
4.一定要将前面1的HPLC图谱进行对比制备液相所走的时间及峰值曲线，这样就能更好的把控；
5.如果流动性不行，赶紧换成你检验你产品用的溶剂（比如粗品，成品的方法）。
6.C18柱子不可行的话，建议更换。
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3楼2012-08-25 08:11:25
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clcivilian

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢啦 2012-08-25 08:34:43
月下飞雪: 金币+10 2012-09-06 08:44:12
本帖内容被屏蔽
4楼2012-08-25 08:20:00
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kennywong

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-08-28 10:46:16
楼主确定第二第三个峰出自你的样品里？ 而不是溶剂或者其他带来的？
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5楼2012-08-27 09:08:58
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月下飞雪

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by kennywong at 2012-08-27 09:08:58
楼主确定第二第三个峰出自你的样品里？ 而不是溶剂或者其他带来的？

可以确定出自样品里，不是溶剂，到底怎么回事呢，大侠指点下呗
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6楼2012-08-27 15:49:13
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kennywong

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-08-28 10:46:22
月下飞雪: 金币+10 2012-09-06 08:45:23
是不是中低压？
我以前也出过类似你的情况 其实还是设备或者条件的问题 虽然出现了几个峰 貌似是分开了 其实还是达不到分离的要求
第二第三个峰其实只是分出来很少的一部分 绝大多数还是在第一个峰里面
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7楼2012-08-28 09:12:58
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-08-28 10:46:28
月下飞雪: 金币+5 2012-09-06 08:45:08
你的流速有些大了，建议在做时，注意流速控制，分开收集，需要换不同容积的柱子哦
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精益求精
8楼2012-08-28 09:59:53
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zhu199435

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
豆哥: 金币+1, 鼓励新虫 2012-08-28 13:38:27
可能是这个样品的第一个峰很容易坏，容易变成后面二个物质。
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9楼2012-08-28 13:16:25
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月下飞雪

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kennywong at 2012-08-28 09:12:58
是不是中低压？
我以前也出过类似你的情况 其实还是设备或者条件的问题 虽然出现了几个峰 貌似是分开了 其实还是达不到分离的要求
第二第三个峰其实只是分出来很少的一部分 绝大多数还是在第一个峰里面

是中压，大侠后来怎么解决的呢？
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10楼2012-08-28 20:58:57
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