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shui219

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】液相色谱如何增大物质保留时间的间隔 已有13人参与

我的柱子是C18柱(4.6X250),流动相是乙腈:pH4.0的醋酸缓冲液=5:95,流速是0.5ml/min,检测波长210nm,在4.5分钟与5.2分钟各有一个吸收峰,且5.2分钟的峰与甲醇溶剂峰有重叠,这是不是说明这俩物质,一个极性大于甲醇,一个极性接近甲醇?有没有什么方法能使保留时间的间隔增大?因为接下来我要做制备色谱,如果只差0.7分钟应该不能满足条件的。另外,我的物质是什么我也不知道,只是做活性物质分离的。不甚感激!
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jxf8257

银虫 (正式写手)


shui219(金币+1):谢谢参与
把梯度调缓一点吧
2楼2010-05-27 18:30:02
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jianghz10

木虫 (职业作家)


shui219(金币+1):谢谢参与
用梯度洗脱啊!把4.5分钟出峰以后的的梯度加大或者减小,这样就能拉开一些!
付出必有收获,知足所以常乐!
3楼2010-05-27 18:41:41
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jiaoyuanming

至尊木虫 (著名写手)


shui219(金币+1):谢谢参与
1把梯度放缓, 即相同时间走更少的梯度,使极性变化慢一些 , 改变温度, 调节流速。等或者更换溶剂。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2010-05-27 18:48:19
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jsj198037

金虫 (正式写手)

★ ★
shui219(金币+1):谢谢参与
westzilch(金币+1):谢谢交流! 2010-05-27 20:25:19
1、梯度洗脱:前面的峰出来后改变流动相比例,减缓后一峰出峰时间
2、柱温箱:温度低点对你应该有帮助
3、减缓流速试试,或许有收获
。。。。。。。
暂时只想到这些
回头再考虑考虑
人总是不断的从一个围墙中走到另一个围墙,直到。。。
5楼2010-05-27 18:51:55
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jsj198037

金虫 (正式写手)


huqiu1953(金币+1):感谢您认真回帖参与交流~欢迎常来药学专区~让我们共同进步~ 2010-05-29 12:15:50
引用回帖:
Originally posted by jsj198037 at 2010-05-27 18:51:55:
1、梯度洗脱:前面的峰出来后改变流动相比例,减缓后一峰出峰时间
2、柱温箱:温度低点对你应该有帮助
3、减缓流速试试,或许有收获
。。。。。。。
暂时只想到这些
回头再考虑考虑

减缓流速峰会比较凸
你的目的不是要图谱
只要能分离开无所谓啦
可以拖久点应该没问题
人总是不断的从一个围墙中走到另一个围墙,直到。。。
6楼2010-05-27 18:53:12
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gf1201

金虫 (正式写手)


shui219(金币+1):谢谢参与
降低流速。流动相换成乙腈和水试试。实验过程中涉及到甲醇吗,怎么会有甲醇峰呢?
充满自信,勇于承担
7楼2010-05-27 19:12:57
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hm3681

铜虫 (小有名气)


shui219(金币+1):谢谢参与
用梯度洗脱,放缓流速,(不用甲醇),你再试试
8楼2010-05-27 19:36:52
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shui219

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by gf1201 at 2010-05-27 19:12:57:
降低流速。流动相换成乙腈和水试试。实验过程中涉及到甲醇吗,怎么会有甲醇峰呢?

我的东西是甲醇溶的,所以有甲醇的溶剂吸收峰。
9楼2010-05-27 19:44:13
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shui219

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by jsj198037 at 2010-05-27 18:53:12:


减缓流速峰会比较凸
你的目的不是要图谱
只要能分离开无所谓啦
可以拖久点应该没问题

我是想过梯度洗脱,不过我才刚开始做,不太懂要怎么设梯度,您能不能给我说详细些呢?我试了乙腈水,乙腈的含量越高的话,保留时间是越接近的。那如果在4.5分钟之后调梯度,C18柱能承受的最少有机相是5%,那我只能把乙腈的含量增大,那么后一个峰不是更快出来?流速也是调低了的,但是感觉继续把流速调低,变化不是很大,因为0.5和0.7就差不太多,所以我就用了0.5.
10楼2010-05-27 19:47:51
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