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shui219

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助】液相色谱如何增大物质保留时间的间隔已有13人参与

我的柱子是C18柱（4.6X250），流动相是乙腈：pH4.0的醋酸缓冲液=5：95，流速是0.5ml/min，检测波长210nm，在4.5分钟与5.2分钟各有一个吸收峰，且5.2分钟的峰与甲醇溶剂峰有重叠，这是不是说明这俩物质，一个极性大于甲醇，一个极性接近甲醇？有没有什么方法能使保留时间的间隔增大？因为接下来我要做制备色谱，如果只差0.7分钟应该不能满足条件的。另外，我的物质是什么我也不知道，只是做活性物质分离的。不甚感激！

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1楼2010-05-27 17:59:02

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shui219

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引用回帖:

Originally posted by jsj198037 at 2010-05-27 18:53:12:

减缓流速峰会比较凸
你的目的不是要图谱
只要能分离开无所谓啦
可以拖久点应该没问题

我是想过梯度洗脱，不过我才刚开始做，不太懂要怎么设梯度，您能不能给我说详细些呢？我试了乙腈水，乙腈的含量越高的话，保留时间是越接近的。那如果在4.5分钟之后调梯度，C18柱能承受的最少有机相是5%，那我只能把乙腈的含量增大，那么后一个峰不是更快出来？流速也是调低了的，但是感觉继续把流速调低，变化不是很大，因为0.5和0.7就差不太多，所以我就用了0.5.