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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】液相色谱如何增大物质保留时间的间隔
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shui219

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】液相色谱如何增大物质保留时间的间隔 已有13人参与

我的柱子是C18柱（4.6X250），流动相是乙腈：pH4.0的醋酸缓冲液=5：95，流速是0.5ml/min，检测波长210nm，在4.5分钟与5.2分钟各有一个吸收峰，且5.2分钟的峰与甲醇溶剂峰有重叠，这是不是说明这俩物质，一个极性大于甲醇，一个极性接近甲醇？有没有什么方法能使保留时间的间隔增大？因为接下来我要做制备色谱，如果只差0.7分钟应该不能满足条件的。另外，我的物质是什么我也不知道，只是做活性物质分离的。不甚感激！
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1楼 2010-05-27 17:59:02
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jxf8257

银虫 (正式写手)
★
shui219(金币+1):谢谢参与
把梯度调缓一点吧
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2楼2010-05-27 18:30:02
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jianghz10

木虫 (职业作家)
★
shui219(金币+1):谢谢参与
用梯度洗脱啊！把4.5分钟出峰以后的的梯度加大或者减小，这样就能拉开一些！
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付出必有收获，知足所以常乐！
3楼2010-05-27 18:41:41
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jiaoyuanming

至尊木虫 (著名写手)
★
shui219(金币+1):谢谢参与
1把梯度放缓， 即相同时间走更少的梯度，使极性变化慢一些 ， 改变温度， 调节流速。等或者更换溶剂。
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2013125027
4楼2010-05-27 18:48:19
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jsj198037

金虫 (正式写手)
★ ★
shui219(金币+1):谢谢参与
westzilch(金币+1):谢谢交流！ 2010-05-27 20:25:19
1、梯度洗脱：前面的峰出来后改变流动相比例，减缓后一峰出峰时间
2、柱温箱：温度低点对你应该有帮助
3、减缓流速试试，或许有收获
。。。。。。。
暂时只想到这些
回头再考虑考虑
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人总是不断的从一个围墙中走到另一个围墙，直到。。。
5楼2010-05-27 18:51:55
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jsj198037

金虫 (正式写手)
★
huqiu1953(金币+1):感谢您认真回帖参与交流~欢迎常来药学专区~让我们共同进步~ 2010-05-29 12:15:50
引用回帖:
Originally posted by jsj198037 at 2010-05-27 18:51:55:
1、梯度洗脱：前面的峰出来后改变流动相比例，减缓后一峰出峰时间
2、柱温箱：温度低点对你应该有帮助
3、减缓流速试试，或许有收获
。。。。。。。
暂时只想到这些
回头再考虑考虑

减缓流速峰会比较凸
你的目的不是要图谱
只要能分离开无所谓啦
可以拖久点应该没问题
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人总是不断的从一个围墙中走到另一个围墙，直到。。。
6楼2010-05-27 18:53:12
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gf1201

金虫 (正式写手)
★
shui219(金币+1):谢谢参与
降低流速。流动相换成乙腈和水试试。实验过程中涉及到甲醇吗，怎么会有甲醇峰呢？
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充满自信，勇于承担
7楼2010-05-27 19:12:57
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hm3681

铜虫 (小有名气)
★
shui219(金币+1):谢谢参与
用梯度洗脱，放缓流速，（不用甲醇），你再试试
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8楼2010-05-27 19:36:52
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shui219

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by gf1201 at 2010-05-27 19:12:57:
降低流速。流动相换成乙腈和水试试。实验过程中涉及到甲醇吗，怎么会有甲醇峰呢？

我的东西是甲醇溶的，所以有甲醇的溶剂吸收峰。
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9楼2010-05-27 19:44:13
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shui219

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by jsj198037 at 2010-05-27 18:53:12:


减缓流速峰会比较凸
你的目的不是要图谱
只要能分离开无所谓啦
可以拖久点应该没问题

我是想过梯度洗脱，不过我才刚开始做，不太懂要怎么设梯度，您能不能给我说详细些呢？我试了乙腈水，乙腈的含量越高的话，保留时间是越接近的。那如果在4.5分钟之后调梯度，C18柱能承受的最少有机相是5%，那我只能把乙腈的含量增大，那么后一个峰不是更快出来？流速也是调低了的，但是感觉继续把流速调低，变化不是很大，因为0.5和0.7就差不太多，所以我就用了0.5.
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10楼2010-05-27 19:47:51
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