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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】液相色谱如何增大物质保留时间的间隔
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shui219

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by jiaoyuanming at 2010-05-27 18:48:19:
1把梯度放缓， 即相同时间走更少的梯度，使极性变化慢一些 ， 改变温度， 调节流速。等或者更换溶剂。

我用的是等度洗脱啊！就是不用调梯度，所以想求助各位的。谢谢你啊~
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11楼2010-05-27 19:48:48
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sky1219

新虫 (初入文坛)
★
shui219(金币+1):谢谢参与
我在一个说明书上看到说; 在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液.不知为什么，你考虑一下。
我也刚开始学液相色谱，向大家学习一下。
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12楼2010-05-27 21:13:08
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lovefred

银虫 (正式写手)
★ ★
shui219(金币+1):谢谢参与
westzilch(金币+1):谢谢交流！ 2010-05-27 22:18:31
楼主的有机相比例已经很低了。。要是再调低或者降流速。。再加上低波长。。个人觉得一是需要更长时间平衡柱子，二是重现性会变差。。楼上几位提到用梯度来做。。个人觉得没必要。。个人建议：1、可以试试正相柱。。2、可以试试内径细的C18柱子。3、乙腈换为甲醇。
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13楼2010-05-27 21:19:45
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shui219

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by lovefred at 2010-05-27 21:19:45:
楼主的有机相比例已经很低了。。要是再调低或者降流速。。再加上低波长。。个人觉得一是需要更长时间平衡柱子，二是重现性会变差。。楼上几位提到用梯度来做。。个人觉得没必要。。个人建议：1、可以试试正相柱。 ...

我先是用甲醇做的，效果没有乙腈的好。我也是想做正相试一下的，可是我们学院好像没有正相柱。老师就说，哪个东西C18做不出来，关键还在流动相，我就无语了。
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14楼2010-05-27 22:45:30
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xiaodu2007693

木虫 (著名写手)

药学版~龙猫
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
wtf66(金币+1):谢谢参与 2010-05-28 16:41:20
你流动相比例多少啊
降低一点，假设你是60%甲醇，你就用55%的或者50%的
前面出来的东西保留时间就会延长
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欢迎您来药学版~
15楼2010-05-28 02:14:27
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jsj198037

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
westzilch(金币+1):谢谢交流！ 2010-05-28 12:13:35
引用回帖:
Originally posted by shui219 at 2010-05-27 19:47:51:

我是想过梯度洗脱，不过我才刚开始做，不太懂要怎么设梯度，您能不能给我说详细些呢？我试了乙腈水，乙腈的含量越高的话，保留时间是越接近的。那如果在4.5分钟之后调梯度，C18柱能承受的最少有机相是5%，那我只 ...

你可以以你最初的分离的比较好的等度的流动相走
第一个峰开始出峰或者在这之前一点就开始减少乙腈的比例
以负梯度来跑
也可以花1-2分钟把流动相过渡到比初始比例稍微低一点的系统
然后等度跑
个人觉得你不需要图谱
只要能分开就OK了
2中梯度方法你都可以试试
再就是稍微降低点流速不知道你试过没有
应该也有效的
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人总是不断的从一个围墙中走到另一个围墙，直到。。。
16楼2010-05-28 08:14:36
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lovefred

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
huqiu1953:额~请注意文明交流~感谢您回帖参与交流~欢迎常来药学专区~让我们共同进步~ 2010-05-29 12:17:01
引用回帖:
Originally posted by shui219 at 2010-05-27 22:45:30:

我先是用甲醇做的，效果没有乙腈的好。我也是想做正相试一下的，可是我们学院好像没有正相柱。老师就说，哪个东西C18做不出来，关键还在流动相，我就无语了。

狗屁说法。。要是什么都能用C18做。。就不会有其他填料出现了。。
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17楼2010-05-28 10:17:10
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lovefred

银虫 (正式写手)
★
huqiu1953(金币+1):谢谢参与交流~ 2010-05-31 22:17:23
引用回帖:
Originally posted by shui219 at 2010-05-27 22:45:30:

我先是用甲醇做的，效果没有乙腈的好。我也是想做正相试一下的，可是我们学院好像没有正相柱。老师就说，哪个东西C18做不出来，关键还在流动相，我就无语了。

有机相甲醇和乙腈混合试下。。
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18楼2010-05-28 10:18:24
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shui219

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by xiaodu2007693 at 2010-05-28 02:14:27:
你流动相比例多少啊
降低一点，假设你是60%甲醇，你就用55%的或者50%的
前面出来的东西保留时间就会延长

水：乙腈的缓冲盐=95：5
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19楼2010-05-28 12:49:41
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yuanchao79

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
xiaodu2007693(金币+1):谢谢交流 2010-05-28 23:55:52
降低甲醇或乙腈比例，就可将两峰拉得更开
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多一点勤奋，多一点理解
20楼2010-05-28 20:27:53
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