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shui219

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】液相色谱如何增大物质保留时间的间隔已有13人参与

我的柱子是C18柱(4.6X250),流动相是乙腈:pH4.0的醋酸缓冲液=5:95,流速是0.5ml/min,检测波长210nm,在4.5分钟与5.2分钟各有一个吸收峰,且5.2分钟的峰与甲醇溶剂峰有重叠,这是不是说明这俩物质,一个极性大于甲醇,一个极性接近甲醇?有没有什么方法能使保留时间的间隔增大?因为接下来我要做制备色谱,如果只差0.7分钟应该不能满足条件的。另外,我的物质是什么我也不知道,只是做活性物质分离的。不甚感激!
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jsj198037

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
westzilch(金币+1):谢谢交流! 2010-05-28 12:13:35
引用回帖:
Originally posted by shui219 at 2010-05-27 19:47:51:

我是想过梯度洗脱,不过我才刚开始做,不太懂要怎么设梯度,您能不能给我说详细些呢?我试了乙腈水,乙腈的含量越高的话,保留时间是越接近的。那如果在4.5分钟之后调梯度,C18柱能承受的最少有机相是5%,那我只 ...

你可以以你最初的分离的比较好的等度的流动相走
第一个峰开始出峰或者在这之前一点就开始减少乙腈的比例
以负梯度来跑
也可以花1-2分钟把流动相过渡到比初始比例稍微低一点的系统
然后等度跑
个人觉得你不需要图谱
只要能分开就OK了
2中梯度方法你都可以试试
再就是稍微降低点流速不知道你试过没有
应该也有效的
人总是不断的从一个围墙中走到另一个围墙,直到。。。
16楼2010-05-28 08:14:36
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jxf8257

银虫 (正式写手)


shui219(金币+1):谢谢参与
把梯度调缓一点吧
2楼2010-05-27 18:30:02
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jianghz10

木虫 (职业作家)


shui219(金币+1):谢谢参与
用梯度洗脱啊!把4.5分钟出峰以后的的梯度加大或者减小,这样就能拉开一些!
付出必有收获,知足所以常乐!
3楼2010-05-27 18:41:41
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jiaoyuanming

至尊木虫 (著名写手)


shui219(金币+1):谢谢参与
1把梯度放缓, 即相同时间走更少的梯度,使极性变化慢一些 , 改变温度, 调节流速。等或者更换溶剂。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2010-05-27 18:48:19
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