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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】液相色谱如何增大物质保留时间的间隔
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shui219

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】液相色谱如何增大物质保留时间的间隔 已有13人参与

我的柱子是C18柱（4.6X250），流动相是乙腈：pH4.0的醋酸缓冲液=5：95，流速是0.5ml/min，检测波长210nm，在4.5分钟与5.2分钟各有一个吸收峰，且5.2分钟的峰与甲醇溶剂峰有重叠，这是不是说明这俩物质，一个极性大于甲醇，一个极性接近甲醇？有没有什么方法能使保留时间的间隔增大？因为接下来我要做制备色谱，如果只差0.7分钟应该不能满足条件的。另外，我的物质是什么我也不知道，只是做活性物质分离的。不甚感激！
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1楼 2010-05-27 17:59:02
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lovefred

银虫 (正式写手)
★ ★
shui219(金币+1):谢谢参与
westzilch(金币+1):谢谢交流！ 2010-05-27 22:18:31
楼主的有机相比例已经很低了。。要是再调低或者降流速。。再加上低波长。。个人觉得一是需要更长时间平衡柱子，二是重现性会变差。。楼上几位提到用梯度来做。。个人觉得没必要。。个人建议：1、可以试试正相柱。。2、可以试试内径细的C18柱子。3、乙腈换为甲醇。
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13楼2010-05-27 21:19:45
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jxf8257

银虫 (正式写手)
★
shui219(金币+1):谢谢参与
把梯度调缓一点吧
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2楼2010-05-27 18:30:02
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jianghz10

木虫 (职业作家)
★
shui219(金币+1):谢谢参与
用梯度洗脱啊！把4.5分钟出峰以后的的梯度加大或者减小，这样就能拉开一些！
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付出必有收获，知足所以常乐！
3楼2010-05-27 18:41:41
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jiaoyuanming

至尊木虫 (著名写手)
★
shui219(金币+1):谢谢参与
1把梯度放缓， 即相同时间走更少的梯度，使极性变化慢一些 ， 改变温度， 调节流速。等或者更换溶剂。
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2013125027
4楼2010-05-27 18:48:19
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