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杨柳依净水

铜虫 (小有名气)

[求助] 制备型液相色谱如何确定收集时间 已有4人参与

现有一混合物,想确定里面两种物质的含量,但无纯品,不知道出峰时间。导师说用制备型液相色谱制备纯品,但不知道收集时间,该怎么确定?谢谢
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至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
现在HPLC上摸索,确定出峰时间,再转移方法至PreHPLC上。
归零
2楼2015-03-30 16:24:16
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xuchao7447

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先用少量的混合物摸索流动相条件,有现成的更好!保证这两种物质保留时间完全错开,收集的时候把一整个峰收进去就可以了,取一点样做个质谱基本就OK啦!
生活就是如此
3楼2015-03-30 16:29:03
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杨柳依净水

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xuchao7447 at 2015-03-30 16:29:03
先用少量的混合物摸索流动相条件,有现成的更好!保证这两种物质保留时间完全错开,收集的时候把一整个峰收进去就可以了,取一点样做个质谱基本就OK啦!

收集时能确保只收集一个峰,不会有其他东西?因为还没接触过仪器,所以不清楚
4楼2015-03-31 09:08:42
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peter002

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by 杨柳依净水 at 2015-03-31 09:08:42
收集时能确保只收集一个峰,不会有其他东西?因为还没接触过仪器,所以不清楚...

收集的时间要摸索的,仪器不一样,延迟时间不同。
5楼2015-03-31 11:28:41
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最好先走个LC-MS证明有要的东西,也看个大致比例和极性(出峰位置)。然后再上制备。

先用较稀的样品小体积进样摸条件。比方说真正制备时用200mg/mL的溶液每针打500uL,你可以从100mg/mL,50uL开始摸条件,目的是要的东西和杂质分开,峰形好。然后设定收集要的组分,逐渐加大进样量和浓度,并微调收集参数,兼顾产率和纯度。必要时牺牲产率顾纯度。

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2015-03-31 14:33:02
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杨柳依净水

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by superyeast at 2015-03-31 14:33:02
最好先走个LC-MS证明有要的东西,也看个大致比例和极性(出峰位置)。然后再上制备。

先用较稀的样品小体积进样摸条件。比方说真正制备时用200mg/mL的溶液每针打500uL,你可以从100mg/mL,50uL开始摸条件,目的是 ...

恩,谢谢,回头试试
7楼2015-03-31 15:26:46
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