| 查看: 7911 | 回复: 16 | ||||
[求助]
怎么才能把WB的内参调齐啊？大家交流一下。 已有2人参与
|
||||
| RT: 我是收完样品之后，离心取上清，然后用BCA测浓度，之后使每个样品的体积和浓度一样，浓度大的用PBS补齐，加入相同体积的loading buffer，95度煮样10min，我觉得我的方法没问题啊？但是每次跑出来ACTIN 都不齐，很明显，感觉很奇怪，难道是手法有问题，大家帮我分析分析吧！多谢！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 收藏夹 |
» 猜你喜欢
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有7人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有7人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有7人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有8人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有10人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有7人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有11人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助！！！WB内参、抗体的问题。
已经有6人回复
- 求助关于WB的内参问题
已经有3人回复
- WB目的条带只看见一片黑，内参清晰可见
已经有7人回复
- wb植物内参抗体选择
已经有3人回复
- WB 有内参 么有目得。why ?
已经有4人回复
- 【求助/交流】转染pNFκB-luc(报告基因质粒)需要共转染一个内参质粒的作用
已经有7人回复
- 【求助】WB中，核蛋白内参和总蛋白内参的问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】western blot的内参总是不齐怎么办
已经有19人回复
- 【求助/交流】WB显影后最后一个条带出现双条带？
已经有4人回复
- 【求助/交流】小鼠单抗做WB的问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】RTPCR 内参
已经有4人回复
DIANDIAN12
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 120.1
- 帖子: 23
- 在线: 11.8小时
- 虫号: 1967719
- 注册: 2012-09-01
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
16楼2015-05-02 13:37:06
15楼2015-04-14 10:36:21
2楼2015-03-28 23:11:34
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
露的想念: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-03-29 13:51:39
感谢参与，应助指数 +1
露的想念: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-03-29 13:51:39
|
如果你选择生长情况相同的细胞，无需测浓度，加相同体积的buffer以后直接煮样品就可以了。 如果你表达某些影响细胞生长的基因，你可以做一次不同梯度稀释队的western摸一下条件。例如我表达一个与细胞死亡相关的细胞时候，我会适当增加WT的buffer量，稀释WT细胞，达到平衡 |
3楼2015-03-29 12:37:28
4楼2015-03-29 13:21:25
5楼2015-03-29 13:21:46
6楼2015-03-29 13:22:29
7楼2015-03-29 13:24:41
8楼2015-03-29 13:35:36
9楼2015-03-29 13:42:46
10楼2015-03-29 13:47:07
30