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紧急求助:用凝血酶切GST时,但目标蛋白短时间内被降解,怎么回事? 已有1人参与
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| 本人利用gst标签纯化处一种蛋白,但过完亲和柱后在用凝血酶切标签时,短时间(1.5h)内目标蛋白(42KD左右)被降解,这期间gst标签也会被正常切下。跑变性电泳,只会得到标签(27KD)条带和标签下的一条带,但用凝胶色谱柱分离时,第一个峰对应的是下面的条带,第二个峰对应的才是GST标签,酶切条件是25摄氏度,80rmp。望各位大神给予帮助分析分析原因,初来报到,金币有限,在此献出全部家当寻求帮助,拜托拜托....... |
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2楼2015-03-19 02:18:12
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