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明天新的一天

新虫 (小有名气)

[求助] C18反相柱分离氨基酸,保留时间太短 已有6人参与

用C18反相柱分离一段多肽,保留时间太短,只有零点几分钟,怎样才能使之保留时间变长?求指教!越详细越好!用的流动相为0.1%FA in water 和纯乙醇。
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议换根专门分析氨基酸的色谱柱,分析氨基酸C18不是很适用。
归零
2楼2015-03-18 15:50:38
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jessiejzx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Agilent啥的都有氨基酸柱,普通C18不适合分离氨基酸
淡泊以明志,宁静以致远
3楼2015-03-18 16:50:35
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zxg_4545

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个没保留啊,把FA改成TFA0.1%试试,分析肽段,一般都加TFA增加肽段保留性。分离氨基酸更要加TFA,但是氨基酸大部分HPLC没有响应,用LCMS检测。
4楼2015-03-19 09:52:54
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pfizer2001

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先一般不用甲酸,用三氟乙酸测吧!
另外普通的反相的柱子对极性的氨基酸不保留,换有极性键和基团的色谱柱吧!安捷伦沃特世都有的!
5楼2015-03-19 10:57:52
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loveleech

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

不知道你是做的什么氨基酸   具体名字   我用C18的柱子可以检测一部分氨基酸
冷笑的氰化钾
6楼2015-03-23 14:10:48
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loveleech

新虫 (初入文坛)

加点离子对试剂  一般可以显著延长  但是蛮伤柱子的
冷笑的氰化钾
7楼2015-03-23 16:45:59
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MHSW

禁言 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

8楼2015-09-23 16:53:55
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