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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 分离纯化极性很强的未知抗生素
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4679540

银虫 (初入文坛)

[求助] 分离纯化极性很强的未知抗生素

各位大侠，小弟做分离纯化已有一段日子了，特来求教。我这是极性很强的抗真菌活性物质，在碱性条件下容易失活，小分子物质，用阳离子交换树脂粗分，薄层上显示三个条带，两条带没有活性。液相结果显示很纯，可能是杂质紫外没有吸收峰，也可能是杂质峰在包括在活性峰里。下一步当然是要除去杂质，首先想到的是过凝胶柱，如果杂质和活性物质分子量差不多该肿么办？对分离纯化已经很受伤了，希望大侠们畅所欲言，对分离纯化我的这种物质有没有好的建议和看法，不胜感激~
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1楼 2012-06-04 16:37:59
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回帖置顶 ( 共有2个 )

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+1, 很有可能 2012-06-08 08:35:54
silicare: BioEPI+1, 应助指数+1 2012-06-08 08:36:36
是不是液相上由于极性太大，同系物之类的峰拉不开？换换流动相试试...
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8楼2012-06-07 12:43:21
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zjl01234

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare: 金币+3, BioEPI+1, 应助指数+1 2012-07-19 09:04:05
做几个薄层小板分别积累3个点的粉进液相看峰的情况吧，没峰的话改变下流动相试试。有木有杂质打个谱就清楚了，也许还能知道杂质是啥。我以前做过用软板来积累纯品的量，就是直接在大玻璃板上铺硅胶，不放CMC钠，然后挖个槽加含样品的硅胶，一次展开就能有很多，顾觉奋的《分离纯化工艺原理》里面好像提过，办法虽土对未知物来说是个万能的少量制备的方法，之前我也在分一个未知抗生素，顾老师就是这样教我得到了一点纯品，后面就决定改用硅胶柱做分离纯化了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4679540
16楼2012-07-18 01:00:00
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

俗妮儿~

银虫 (正式写手)
引用回帖:
26楼: Originally posted by 4679540 at 2012-09-19 15:12:21
哎，苦逼啊！老板根本不懂分离纯化，对我不闻不问，只关心他懂的方面的课题，想都不要想买什么HILIC柱子。我现在是做一天和尚撞一天钟，本来很有信心做下去，现在一点没了。非常感谢你啊！...

只能劝你坚定信心往下做了，新型抗生素这个东西确实不好分，要是那么容易得到，现在医院里也不会买那么贵了。lz你要加油啊，如果真的分出来，就是一篇专利啊！！
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27楼2012-09-20 08:45:12
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俗妮儿~

银虫 (正式写手)
额……你们老师也太……奇葩了吧，这是不是他的课题啊？
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29楼2012-09-20 14:09:06
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4679540

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
29楼: Originally posted by 俗妮儿~ at 2012-09-20 14:09:06
额……你们老师也太……奇葩了吧，这是不是他的课题啊？

哎，我现在混混毕业就算了，本来还考博，现在感觉一点激情都没了，研究生三年真是煎熬啊。
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30楼2012-09-20 19:07:34
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普通回帖

kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个……根据条件试试别的柱子啊，反相，疏水等都试试，同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。
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2楼2012-06-05 15:30:55
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4679540

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kedaxiaoyu at 2012-06-05 15:30:55
这个……根据条件试试别的柱子啊，反相，疏水等都试试，同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。

我们老师不懂，又不舍得花钱。只要是我们实验室有的我都试过了。我离子交换柱条件摸了很久，现在差不多是最好了，但是还是有杂质。反相、疏水什么的都没有。我最近在过凝胶，不行就试试硅胶了。哎~
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3楼2012-06-05 20:10:29
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

大小差不多的话用凝胶很难分开吧？
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4楼2012-06-06 08:28:30
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4679540

银虫 (初入文坛)
只能去试试看啊！也不知道大小情况~
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5楼2012-06-06 13:43:53
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monky

金虫 (著名写手)
用大孔树脂试试
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6楼2012-06-06 15:15:23
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炎武炽子

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+2, 信息产业厅 2012-06-08 08:35:30
用亲和色谱，或许可以。试着找找你所需要的活性物质的多肽配基
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我自疯狂～～～
7楼2012-06-07 11:21:03
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4679540

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2012-06-07 12:43:21
是不是液相上由于极性太大，同系物之类的峰拉不开？换换流动相试试...

嗯嗯，是的啊！我用的是反相柱，出来结果就一个峰，但薄层上有三个点，流动相用的是乙腈或者甲醇都试过，不同配比也试过，貌似不太好。出峰时间很快，4分钟左右。想做正相，无奈没柱子。
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9楼2012-06-07 16:31:11
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4679540

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 炎武炽子 at 2012-06-07 11:21:03
用亲和色谱，或许可以。试着找找你所需要的活性物质的多肽配基

好的，谢谢~
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10楼2012-06-07 16:34:13
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