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4679540

银虫 (初入文坛)

[求助] 分离纯化极性很强的未知抗生素

各位大侠,小弟做分离纯化已有一段日子了,特来求教。我这是极性很强的抗真菌活性物质,在碱性条件下容易失活,小分子物质,用阳离子交换树脂粗分,薄层上显示三个条带,两条带没有活性。液相结果显示很纯,可能是杂质紫外没有吸收峰,也可能是杂质峰在包括在活性峰里。下一步当然是要除去杂质,首先想到的是过凝胶柱,如果杂质和活性物质分子量差不多该肿么办?对分离纯化已经很受伤了,希望大侠们畅所欲言,对分离纯化我的这种物质有没有好的建议和看法,不胜感激~
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

俗妮儿~

银虫 (正式写手)

引用回帖:
26楼: Originally posted by 4679540 at 2012-09-19 15:12:21
哎,苦逼啊!老板根本不懂分离纯化,对我不闻不问,只关心他懂的方面的课题,想都不要想买什么HILIC柱子。我现在是做一天和尚撞一天钟,本来很有信心做下去,现在一点没了。非常感谢你啊!...

只能劝你坚定信心往下做了,新型抗生素这个东西确实不好分,要是那么容易得到,现在医院里也不会买那么贵了。lz你要加油啊,如果真的分出来,就是一篇专利啊!!
27楼2012-09-20 08:45:12
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俗妮儿~

银虫 (正式写手)

额……你们老师也太……奇葩了吧,这是不是他的课题啊?
29楼2012-09-20 14:09:06
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4679540

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
29楼: Originally posted by 俗妮儿~ at 2012-09-20 14:09:06
额……你们老师也太……奇葩了吧,这是不是他的课题啊?

哎,我现在混混毕业就算了,本来还考博,现在感觉一点激情都没了,研究生三年真是煎熬啊。
30楼2012-09-20 19:07:34
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普通回帖

kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个……根据条件试试别的柱子啊,反相,疏水等都试试,同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。
2楼2012-06-05 15:30:55
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4679540

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kedaxiaoyu at 2012-06-05 15:30:55
这个……根据条件试试别的柱子啊,反相,疏水等都试试,同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。

我们老师不懂,又不舍得花钱。只要是我们实验室有的我都试过了。我离子交换柱条件摸了很久,现在差不多是最好了,但是还是有杂质。反相、疏水什么的都没有。我最近在过凝胶,不行就试试硅胶了。哎~
3楼2012-06-05 20:10:29
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

大小差不多的话用凝胶很难分开吧?
4楼2012-06-06 08:28:30
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4679540

银虫 (初入文坛)

只能去试试看啊!也不知道大小情况~
5楼2012-06-06 13:43:53
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monky

金虫 (著名写手)

用大孔树脂试试
6楼2012-06-06 15:15:23
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炎武炽子

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+2, 信息产业厅 2012-06-08 08:35:30
用亲和色谱,或许可以。试着找找你所需要的活性物质的多肽配基
我自疯狂~~~
7楼2012-06-07 11:21:03
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+1, 很有可能 2012-06-08 08:35:54
silicare: BioEPI+1, 应助指数+1 2012-06-08 08:36:36
是不是液相上由于极性太大,同系物之类的峰拉不开?换换流动相试试...
8楼2012-06-07 12:43:21
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4679540

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2012-06-07 12:43:21
是不是液相上由于极性太大,同系物之类的峰拉不开?换换流动相试试...

嗯嗯,是的啊!我用的是反相柱,出来结果就一个峰,但薄层上有三个点,流动相用的是乙腈或者甲醇都试过,不同配比也试过,貌似不太好。出峰时间很快,4分钟左右。想做正相,无奈没柱子。
9楼2012-06-07 16:31:11
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4679540

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 炎武炽子 at 2012-06-07 11:21:03
用亲和色谱,或许可以。试着找找你所需要的活性物质的多肽配基

好的,谢谢~
10楼2012-06-07 16:34:13
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