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银虫 (初入文坛)

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专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 分离纯化极性很强的未知抗生素

各位大侠，小弟做分离纯化已有一段日子了，特来求教。我这是极性很强的抗真菌活性物质，在碱性条件下容易失活，小分子物质，用阳离子交换树脂粗分，薄层上显示三个条带，两条带没有活性。液相结果显示很纯，可能是杂质紫外没有吸收峰，也可能是杂质峰在包括在活性峰里。下一步当然是要除去杂质，首先想到的是过凝胶柱，如果杂质和活性物质分子量差不多该肿么办？对分离纯化已经很受伤了，希望大侠们畅所欲言，对分离纯化我的这种物质有没有好的建议和看法，不胜感激~

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1楼 2012-06-04 16:37:59

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zjl01234

银虫 (正式写手)

BioEPI: 1
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专业: 微生物药物

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare: 金币+3, BioEPI+1, 应助指数+1 2012-07-19 09:04:05

做几个薄层小板分别积累3个点的粉进液相看峰的情况吧，没峰的话改变下流动相试试。有木有杂质打个谱就清楚了，也许还能知道杂质是啥。我以前做过用软板来积累纯品的量，就是直接在大玻璃板上铺硅胶，不放CMC钠，然后挖个槽加含样品的硅胶，一次展开就能有很多，顾觉奋的《分离纯化工艺原理》里面好像提过，办法虽土对未知物来说是个万能的少量制备的方法，之前我也在分一个未知抗生素，顾老师就是这样教我得到了一点纯品，后面就决定改用硅胶柱做分离纯化了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]