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4679540

银虫 (初入文坛)

[求助] 分离纯化极性很强的未知抗生素

各位大侠,小弟做分离纯化已有一段日子了,特来求教。我这是极性很强的抗真菌活性物质,在碱性条件下容易失活,小分子物质,用阳离子交换树脂粗分,薄层上显示三个条带,两条带没有活性。液相结果显示很纯,可能是杂质紫外没有吸收峰,也可能是杂质峰在包括在活性峰里。下一步当然是要除去杂质,首先想到的是过凝胶柱,如果杂质和活性物质分子量差不多该肿么办?对分离纯化已经很受伤了,希望大侠们畅所欲言,对分离纯化我的这种物质有没有好的建议和看法,不胜感激~
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zjl01234

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare: 金币+3, BioEPI+1, 应助指数+1 2012-07-19 09:04:05
做几个薄层小板分别积累3个点的粉进液相看峰的情况吧,没峰的话改变下流动相试试。有木有杂质打个谱就清楚了,也许还能知道杂质是啥。我以前做过用软板来积累纯品的量,就是直接在大玻璃板上铺硅胶,不放CMC钠,然后挖个槽加含样品的硅胶,一次展开就能有很多,顾觉奋的《分离纯化工艺原理》里面好像提过,办法虽土对未知物来说是个万能的少量制备的方法,之前我也在分一个未知抗生素,顾老师就是这样教我得到了一点纯品,后面就决定改用硅胶柱做分离纯化了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

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16楼2012-07-18 01:00:00
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个……根据条件试试别的柱子啊,反相,疏水等都试试,同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。
2楼2012-06-05 15:30:55
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4679540

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kedaxiaoyu at 2012-06-05 15:30:55
这个……根据条件试试别的柱子啊,反相,疏水等都试试,同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。

我们老师不懂,又不舍得花钱。只要是我们实验室有的我都试过了。我离子交换柱条件摸了很久,现在差不多是最好了,但是还是有杂质。反相、疏水什么的都没有。我最近在过凝胶,不行就试试硅胶了。哎~
3楼2012-06-05 20:10:29
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

大小差不多的话用凝胶很难分开吧?
4楼2012-06-06 08:28:30
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