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18310137195

新虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白表达时有时无 已有4人参与

我最近做了一个蛋白酶,相同的条件下,今天有表达,明天就没有,真不知道是怎么回事
望各位给分析下可能导致这样的因素都有什么
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是在大肠杆菌中做的表达吗?
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-02-27 17:19:37
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w26150665w

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-02-27 21:38:01
1. 菌株是不是接错了
2. 是不是诱导表达条件错了,包括温度、诱导时间
3. 细节上有没疏漏
4. key:当日不适合做实验~~~
5. 低概率 表达质粒丢失
6. 表达过程无法判断是否表达 定性需用SDS-PAGE
7. 其他。。。。
多多交流学习
2楼2015-02-27 09:17:32
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18310137195

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-02-27 17:19:37
是在大肠杆菌中做的表达吗?

是的   诱导温度  时间都一样的
4楼2015-02-27 19:52:29
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18310137195

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by w26150665w at 2015-02-27 09:17:32
1. 菌株是不是接错了
2. 是不是诱导表达条件错了,包括温度、诱导时间
3. 细节上有没疏漏
4. key:当日不适合做实验~~~
5. 低概率 表达质粒丢失
6. 表达过程无法判断是否表达 定性需用SDS-PAGE
7. 其他。。。 ...

你好   菌株没接错,诱导温度、时间都没变,表达质粒也没丢失,因为包涵体有表达,我需要的是上清里的活性表达,所以我现在很郁闷,因为我最近天天在做,时有时无的
5楼2015-02-27 19:55:22
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