应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白表达时有时无
111/2返回列表12下一页
查看: 1211  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

18310137195

新虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白表达时有时无 已有4人参与

我最近做了一个蛋白酶，相同的条件下，今天有表达，明天就没有，真不知道是怎么回事
望各位给分析下可能导致这样的因素都有什么
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-02-26 17:20:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w26150665w

铜虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-02-27 21:38:01
1. 菌株是不是接错了
2. 是不是诱导表达条件错了，包括温度、诱导时间
3. 细节上有没疏漏
4. key：当日不适合做实验~~~
5. 低概率 表达质粒丢失
6. 表达过程无法判断是否表达 定性需用SDS-PAGE
7. 其他。。。。
赞一下 回复此楼
多多交流学习
2楼2015-02-27 09:17:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是在大肠杆菌中做的表达吗？
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-02-27 17:19:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18310137195

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-02-27 17:19:37
是在大肠杆菌中做的表达吗？

是的   诱导温度  时间都一样的
赞一下 回复此楼
4楼2015-02-27 19:52:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18310137195

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by w26150665w at 2015-02-27 09:17:32
1. 菌株是不是接错了
2. 是不是诱导表达条件错了，包括温度、诱导时间
3. 细节上有没疏漏
4. key：当日不适合做实验~~~
5. 低概率 表达质粒丢失
6. 表达过程无法判断是否表达 定性需用SDS-PAGE
7. 其他。。。 ...

你好   菌株没接错，诱导温度、时间都没变，表达质粒也没丢失，因为包涵体有表达，我需要的是上清里的活性表达，所以我现在很郁闷，因为我最近天天在做，时有时无的
赞一下 回复此楼
5楼2015-02-27 19:55:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 18310137195 at 2015-02-27 19:52:29
是的   诱导温度  时间都一样的...

意思是你做出来了，但是是在包涵体中，你想要的是在上清中有表达，如果你第一次在上清中没有表达的话，以后就很难出现了，说明蛋白应该是挺难做的或者对环境太敏感了吧。呵呵，实在做不出来可以找个公司做嘛，百度上一搜蛋白表达，排在一两位的公司都可以打电话问问情况嘛，不用自己纠结啦
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
6楼2015-02-28 09:00:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w26150665w

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 18310137195 at 2015-02-27 19:55:22
你好   菌株没接错，诱导温度、时间都没变，表达质粒也没丢失，因为包涵体有表达，我需要的是上清里的活性表达，所以我现在很郁闷，因为我最近天天在做，时有时无的...

排除了 那就剩下 诱导剂浓度了
包涵体表达就是有蛋白表达
你要的是上清表达，就必须优化表达条件

还有一个可能 时有时无 可能出现在你跑SDS-PAGE的时候细节有没问题
赞一下 回复此楼
多多交流学习
7楼2015-02-28 09:09:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

九字江山

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
每次的蛋白表达量很少么?上清活性蛋白表达本来就挺困难的，多半是因为表达条件的问题。。。完全可以找一个做蛋白的公司，让他们来做，最后找他们要份技术报告就可以了，比如这家公司：http://www.detaibio.com/bacteria ... rantee-service.html
赞一下 回复此楼
8楼2015-02-28 09:20:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
质粒不稳定，质粒丢失。。。。。。
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
9楼2015-02-28 09:56:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18310137195

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-02-28 09:00:37
意思是你做出来了，但是是在包涵体中，你想要的是在上清中有表达，如果你第一次在上清中没有表达的话，以后就很难出现了，说明蛋白应该是挺难做的或者对环境太敏感了吧。呵呵，实在做不出来可以找个公司做嘛，百度 ...

因为之前我调节了一下条件，包涵体中是一直都有表达的，但是在上清中就时有时无，要是能直接找公司做，真就省心多了，老板要让我们自己做的
赞一下 回复此楼
10楼2015-03-03 13:35:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 18310137195 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 材料与化工考研调剂 +4 孅華 2026-03-22 4/200 2026-03-23 16:13 by 一休哥FU
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭